Seti ya RT-qPCR ya moja kwa moja
Maelezo ya Kiti:
◮ Direct RT-qPCR Kit, kwa kutumia Foreasy Reverse Transcriptase na Foreasy HS Taq DNA Polymerase inayotengenezwa na Foregene, yenye akiba ya kipekee ya athari, hufanya kifurushi hiki kiwe na ukinzani mkubwa na uoanifu, na kinaweza kujaribu moja kwa moja majibu ya matumizi ya mfumo wa Foregene Lysis kama kiolezo.Seti hii inaweza kutumika kwa ajili ya kifaa cha kutambua COVID-19 asidi ya nukleiki na ukuzaji wa vifaa vya kugundua bakteria wa pathogenic asidi ya nukleiki.
Maelezo
Direct RT-qPCR Kit hutoa bafa ya RT-qPCR iliyowekwa kando na kimeng'enya chenye ufanisi wa hali ya juu.mchanganyiko (Taq, M-MLV, RI), kuifanya iwe rahisi kwa uundaji wa vifaa vya nyuma na mfumo.marekebisho, ndani ya uthibitishaji rahisi.
Vipimo
500T, 50,000T
Vipengele vya kit
| Yaliyomo kwenye vifaa (Mfumo wa majibu ya 20 μL) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50,000 T | |
| Mchanganyiko wa Enzyme ya moja kwa moja | 500 μL×1 | 50 ml×1 |
| 2× Moja kwa moja RT-qPCR Buffer | 1 ml×5 | 500 ml×1 |
| Maagizo | 1 | 1 |
Hatua za Uendeshaji
Kabla ya maandalizi ya reagent, reagents zote katika kit lazima thawed kwenye joto la kawaida na kuchanganywa kwa upole.
A: Jitayarishe of kiolezo na kitendanishi
1. Tayarisha kiolezo cha RNA kilichotayarishwa (Inapendekezwa kutumia mfululizo wa vifaa vya Foregene Total RNA Isolation Kit ili kutoa na kusafisha kiolezo cha RNA) au sampuli ya bidhaa iliyopasuka (Inapendekezwa kutumia mfumo wa Foregene Lysis), primers maalum(10 μM) na vifaa vingine vya matumizi, chombo.
2. Weka 2× Direct RT-qPCR Buffer, RNase-Free ddH2O na 20× ROX Reference Dye (ikiwa ni's inahitajika) kwenye kisanduku chenye barafu, na kufanya haya kuyeyuka kiasili, na kuchanganywa kwa upole.
B: Jitayarishe of RT-qPCR mfumo
Jedwali 1 : Jitayarishe of RT-qPCR smfumo
| Sehemu | Kiasi | Mkusanyiko wa mwisho |
| 2× Moja kwa moja RT-qPCR Buffer | 10 μL | 1× |
| Mchanganyiko wa Enzyme ya moja kwa moja | 1μL | |
| Primer ya Mbele(10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| Kitangulizi cha Nyuma (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| Uchunguzi (4 μM) | 1μL | 200nM |
| Kiolezo (RNA au Lysate) | X μL | |
| 20×ROX Reference Dye | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| Jumla ya Kiasi | 20μL |
C: Weka ya RT-qPCR mwitikio programu
Jedwali 2 : RT-qPCR atharion programu mpangilio (kwa mfano: mbili-hatua njia)
| Hatua | Halijoto | Wakati | Mizunguko | Maudhui | |
| 1 | 50℃ | Dakika 15 | 1* | 1 | Unukuzi wa kinyume |
| 2 | 95℃ | Dakika 1 | 1 | Pre-denaturation | |
| 3 | 95℃ | 10 sek | 40-45 | Denaturation | |
| 60 ℃ | 30 sek 2* | Anneal/Ugani | |||
Uhifadhi na maisha ya rafu
-Kifaa kihifadhiwe saa -20± 5℃.Muda wa uhalali ni miezi 12.
-Epuka mizunguko ya kufungia mara kwa mara (<5 mizunguko).
