• facebook
  • zilizounganishwa
  • youtube
bendera

Ufafanuzi wa istilahi za kimsingi za baiolojia ya molekuli

Seti za Biolojia ya Molekuli

1. cDNA na cccDNA: cDNA ni DNA yenye nyuzi-mbili iliyosanisishwa kwa nakala ya kinyume kutoka kwa mRNA;cccDNA ni plasmid iliyofungwa ya DNA ya duara yenye nyuzi mbili isiyo na kromosomu.
2. Kitengo cha kawaida cha kukunja: kitengo cha muundo wa sekondari wa protini α-hesi na β-karatasi vinaweza kuunda vizuizi vya muundo na mipangilio maalum ya kijiometri kupitia polipeptidi mbalimbali zinazounganisha.Aina hii ya kukunja iliyoamuliwa kawaida huitwa muundo wa sekondari bora.Karibu miundo yote ya juu inaweza kuelezewa na aina hizi za kukunja, na hata aina zao za pamoja, hivyo pia huitwa vitengo vya kawaida vya kukunja.
3. CAP: cyclic adenosine monofosfati (cAMP) receptor protini CRP (cAMP receptor protini), changamano sumu baada ya mchanganyiko wa kambi na CRP inaitwa activating protini CAP (cAMP ulioamilishwa protini)
4. Mfuatano wa Palindromic: Mfuatano wa kinyume unaosaidia wa sehemu ya kipande cha DNA, mara nyingi tovuti ya kizuizi cha kimeng'enya.
5. maikrofoni: RNA inayoingilia kati au RNA ya antisense, ambayo inakamilisha mfuatano wa mRNA na inaweza kuzuia tafsiri ya mRNA.
6. Ribozimu: RNA yenye shughuli ya kichocheo, ambayo ina jukumu la kiotomatiki katika mchakato wa kuunganisha RNA.
7. Motifu: Kuna baadhi ya maeneo ya ndani yenye umbo la pande tatu na topolojia sawa katika muundo wa anga wa molekuli za protini.
8. Peptidi ya ishara: peptidi yenye mabaki 15-36 ya asidi ya amino kwenye N-terminus wakati wa usanisi wa protini, ambayo huongoza transmembrane ya protini.
9. Attenuator: Mfuatano wa nyukleotidi kati ya eneo la opereta na jeni la muundo ambalo hukatisha unukuzi.
10. Uchawi Spot: Wakati bakteria inakua na kukutana na ukosefu kamili wa amino asidi, bakteria itatoa jibu la dharura ili kuacha kujieleza kwa jeni zote.Ishara zinazozalisha jibu hili la dharura ni guanosine tetrafosfati (ppGpp) na guanosine pentaphosphate (pppGpp).Jukumu la PpGpp na pppGpp sio opareni moja au chache tu, lakini huathiri idadi kubwa yao, kwa hivyo huitwa wadhibiti wakuu au matangazo ya uchawi.
11. Kipengele cha mkuzaji wa mkondo wa juu: hurejelea mfuatano wa DNA ambao una jukumu la udhibiti katika shughuli za mtangazaji, kama vile TATA katika eneo la -10, TGACA katika eneo la -35, viboreshaji na vidhibiti.
12. Uchunguzi wa DNA: sehemu iliyo na lebo ya DNA yenye mfuatano unaojulikana, ambayo hutumiwa sana kugundua mfuatano usiojulikana na jeni lengwa la skrini.
13. Mfuatano wa SD: Ni mfuatano unaounganisha wa ribosomu na mRNA, ambao hudhibiti tafsiri.
14. Kingamwili ya Monokloni: Kingamwili inayofanya kazi dhidi ya kibainishi kimoja tu cha antijeni.
15. Cosmid: Ni vekta ya DNA ya kigeni iliyotengenezwa kwa njia bandia ambayo huhifadhi maeneo ya COS katika ncha zote mbili za fagio na kuunganishwa kwenye plasmid.
16. Uchunguzi wa madoa ya rangi ya samawati-nyeupe: Jeni ya LacZ (inayosimba β-galactosidase), kimeng'enya kinaweza kuoza substrate ya chromogenic X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indole-β-D-galactoside) kutoa bluu, na hivyo kufanya aina hiyo kuwa ya bluu.Wakati DNA ya nje inapoingizwa, jeni la LacZ haliwezi kuonyeshwa, na shida ni nyeupe, ili kuchunguza bakteria ya recombinant.Hii inaitwa uchunguzi wa bluu-nyeupe.
17. Kipengele cha uigizaji wa Cis: Mfuatano mahususi wa besi katika DNA ambao hudhibiti usemi wa jeni.
18. Klenow kimeng'enya: Kipande kikubwa cha DNA polymerase I, isipokuwa shughuli ya 5' 3' ya exonuclease imeondolewa kutoka kwa DNA polymerase I holoenzyme.
19. Anchored PCR: hutumika kukuza DNA ya kuvutia kwa mfuatano unaojulikana katika ncha moja.Mkia wa poly-dG uliongezwa kwenye ncha moja ya mlolongo usiojulikana, na kisha poly-dC na mlolongo unaojulikana ulitumiwa kama vianzilishi kwa ukuzaji wa PCR.
20. Protini ya kuunganishwa: Jeni ya protini ya yukariyoti imeunganishwa na jeni ya nje, na protini inayojumuisha tafsiri ya protini ya jeni asili na protini ya nje huonyeshwa kwa wakati mmoja.

Masharti mengine ya baiolojia ya molekuli

1. Ramani halisi ya DNA ni mpangilio ambao vipande (vikwazo vya endonuclease-digested) vya molekuli ya DNA hupangwa.
2. Mgawanyiko wa RNase umegawanywa katika aina mbili (autocatalysis) na (heterocatalysis).
3. Kuna mambo matatu ya kufundwa katika prokariyoti ni (IF-1), (IF-2) na (IF-3).
4. Protini za Transmembrane zinahitaji mwongozo (peptidi za ishara), na jukumu la chaperones za protini ni (husaidia kukunja mnyororo wa peptidi katika upatanisho wa asili wa protini).
5. Vipengele katika wakuzaji kwa ujumla vinaweza kugawanywa katika aina mbili: (vipengele vya msingi vya waendelezaji) na (vipengele vya mkuzaji wa mkondo).
6. Maudhui ya utafiti wa baiolojia ya molekuli hujumuisha sehemu tatu: (biolojia ya molekuli ya miundo), (usemi na udhibiti wa jeni), na (teknolojia ya kuunganisha upya DNA).
7. Majaribio mawili muhimu yanayoonyesha kwamba DNA ni nyenzo ya urithi ni (maambukizi ya pneumococcus ya panya) na (maambukizi ya T2 ya Escherichia coli).uwezo).
8. Kuna tofauti kuu mbili kati ya hnRNA na mRNA: (hnRNA imegawanywa katika mchakato wa kubadilishwa kuwa mRNA), (mwisho wa 5' wa mRNA huongezwa kwa kofia ya m7pGppp, na kuna polyadenylation ya ziada kwenye mwisho wa 3' wa asidi ya mRNA (polyA) mkia).
9. Faida za aina ya subunit nyingi za protini ni (subunit ni njia ya kiuchumi ya matumizi ya DNA), (inaweza kupunguza athari za makosa ya random katika usanisi wa protini kwenye shughuli za protini), (shughuli inaweza kuwa kwa ufanisi sana na kwa haraka hufunguliwa na kufungwa).
10. Maudhui kuu ya utaratibu wa kukunja protini nadharia ya kwanza ya nukleation ni pamoja na (nucleation), (utajiri wa miundo), (upangaji upya wa mwisho).
11. Galactose ina athari mbili kwa bakteria;kwa upande mmoja (inaweza kutumika kama chanzo cha kaboni kwa ukuaji wa seli);kwa upande mwingine (pia ni sehemu ya ukuta wa seli).Kwa hivyo, mkuzaji wa kujitegemea wa CAMP-CRP S2 inahitajika kwa usanisi wa kudumu katika kiwango cha usuli;wakati huo huo, promota tegemezi wa CAMP-CRP S1 inahitajika ili kudhibiti usanisi wa kiwango cha juu.Unukuzi huanza kutoka ( S2 ) na G na kutoka ( S1 ) bila G.
12. Teknolojia ya DNA ya recombinant pia inajulikana kama (cloning ya jeni) au (cloning ya molekuli).Kusudi kuu ni (kuhamisha habari za urithi za DNA katika kiumbe kimoja hadi kiumbe kingine).Jaribio la kawaida la ujumuishaji upya wa DNA kwa kawaida hujumuisha hatua zifuatazo: (1) Chopoa jeni lengwa (au jeni la nje) la kiumbe anayefadhili, na uunganishe kwa njia ya enzymatically kwenye molekuli nyingine ya DNA (cloning vector) ili kuunda molekuli mpya ya DNA recombinant.② Molekuli ya DNA inayopatana huhamishwa hadi kwenye seli ya mpokeaji na kuigwa katika seli ya mpokeaji.Utaratibu huu unaitwa mabadiliko.③ Chunguza na utambue seli zile za wapokeaji ambazo zimefyonza DNA iliyounganishwa tena.④Kuza seli zilizo na DNA recombinant kwa wingi ili kutambua kama jeni la msaada wa kigeni limeonyeshwa.
13. Kuna aina mbili za urudufishaji wa plasmid: zile ambazo zinadhibitiwa kwa ukali na usanisi wa protini ya seli ya mwenyeji huitwa (plasmidi kali), na zile ambazo hazidhibitiwi kabisa na usanisi wa protini ya seli za seli huitwa (plasmidi zilizorejeshwa).
14. Mfumo wa majibu ya PCR unapaswa kuwa na masharti yafuatayo: a.Vianzilishi vya DNA (kama besi 20) na mifuatano inayosaidiana katika kila ncha ya nyuzi mbili za jeni lengwa zitakazotenganishwa.b.Enzymes zilizo na uthabiti wa joto kama vile: TagDNA polymerase.c, dNTPd, mfuatano wa DNA wa riba kama kiolezo
15. Mchakato wa majibu ya msingi wa PCR ni pamoja na hatua tatu: (denaturation), (annealing), na (ugani).
16. Mchakato wa kimsingi wa wanyama waliobadili maumbile kwa kawaida hujumuisha: ①Kuanzishwa kwa jeni ngeni katika kiini cha yai lililorutubishwa au seli ya kiinitete;②Kupandikiza yai lililorutubishwa au seli ya shina la kiinitete ndani ya uterasi ya mwanamke;③ Ukuaji na ukuaji kamili wa kiinitete Kwa watoto walio na jeni za kigeni;④ Tumia wanyama hawa ambao wanaweza kutoa protini za kigeni kama mifugo kuzaliana mistari mipya ya homozygous.
17. Mistari ya seli ya Hybridoma huzalishwa kwa kuchanganya (wengu B) seli na seli za (myeloma), na kwa kuwa (seli za wengu) zinaweza kutumia hypoxanthine na (seli za mfupa) kutoa kazi za mgawanyiko wa seli, zinaweza kukuzwa katika kati ya HAT.kukua.
18. Kwa kuongezeka kwa utafiti, kizazi cha kwanza cha antibodies huitwa (antibodies za polyclonal), kizazi cha pili (antibodies za monoclonal), na kizazi cha tatu (antibodies za uhandisi wa maumbile).
19. Kwa sasa, uhandisi wa maumbile ya virusi vya wadudu huzingatia hasa baculovirus, ambayo inaonyeshwa katika kuanzishwa kwa (jeni la sumu ya exogenous);(jeni zinazoharibu mzunguko wa maisha ya kawaida ya wadudu);(marekebisho ya jeni za virusi).
20. Sababu za protini zinazofanya kazi zinazolingana na vipengele vya kawaida vya TATA, GC, na CAAT katika kikuzaji cha mamalia cha RNA polymerase II ni (TFIID), (SP-1) na (CTF/NF1), mtawalia.
ishirini na moja.Vipengele vya msingi vya unukuzi vya RNA polymerase Ⅱ ni, TFⅡ-A, TFⅡ-B, TFII-D, TFⅡ-E, na mlolongo wao wa kisheria ni: (D, A, B, E).Ambapo kazi ya TFII-D ni (inayofunga kwa sanduku la TATA).
ishirini na mbili.Vipengele vingi vya unukuzi vinavyofungamana na DNA hufanya kazi katika mfumo wa dimers.Vikoa vya utendaji vya vipengele vya unukuzi vinavyofungamana na DNA kwa kawaida ni vifuatavyo (helix-turn-helix), (motifu ya kidole cha zinki), (basic-leucine) motif ya zipu).
ishirini na tatu.Kuna aina tatu za vizuizi vya njia za mpasuko wa endonuclease: (kata kwa upande wa 5' wa mhimili wa ulinganifu ili kutoa ncha zenye kunata 5'), (kata kwa upande wa 3' wa mhimili wa ulinganifu ili kutoa ncha 3' zinazonata (kata kwenye mhimili wa ulinganifu ili kutoa sehemu bapa) ).
ishirini na nne.DNA ya Plasmid ina usanidi tatu tofauti: (usanidi wa SC), (usanidi wa oc), (usanidi wa L).Ya kwanza katika electrophoresis ni (usanidi wa SC).
25. Mifumo ya kujieleza kwa jeni ya kigeni, hasa (Escherichia coli), (Chachu), (Mdudu) na (meza ya seli za Mamalia).
26. Mbinu zinazotumiwa kwa kawaida kwa wanyama waliobadili maumbile ni: (njia ya maambukizi ya virusi vya ukimwi), (njia ya sindano ndogo ya DNA), (mbinu ya seli ya kiinitete).

Maombi Biolojia ya Masi

1. Taja kazi za zaidi ya RNA 5?
Uhamisho wa RNA tRNA Uhamisho wa amino asidi Ribosomu RNA rRNA Ribosomu hufanya mjumbe RNA mRNA Kiolezo cha Usanisi wa protini RNA hnRNA ya nyuklia ya RNA hnRNA Mtangulizi wa mRNA ndogo ya nyuklia iliyokomaa RNA snRNA Inahusika katika kuunganisha hnRNA na uunganishaji wa protini ya RNA iliyosawazishwa/Plasiti ndogo ya RNA iliyosawazishwa-SLNdogo ya saitoplazimu ya RNA iliyosawazishwa-SL. vijenzi vya mwili vya utambuzi wa mawimbi Antisense RNA anRNA/micRNA Hudhibiti usemi wa jeni Ribozimu RNA Amilifu kwa RNA.
2. Je! ni tofauti gani kuu kati ya waendelezaji wa prokaryotic na eukaryotic?
Prokaryotic TTGACA --- TATAAT------Maeneo ya Kuanzishwa-35 -10 Kiboreshaji cha Eukaryotic---GC ---CAAT----TATAA-5mGpp-Mahali-Kuanzishwa-110 -70 -25
3. Je, ni mambo gani kuu ya ujenzi wa bandia wa plasmids asili?
Plamini asilia mara nyingi huwa na kasoro, kwa hivyo hazifai kutumika kama vibebaji vya uhandisi jeni, na lazima zirekebishwe na kutengenezwa: a.Ongeza jeni za kialamisho zinazofaa, kama vile mbili au zaidi, ambazo ni rahisi kutumia kwa uteuzi, kwa kawaida jeni za antibiotiki.b.Ongeza au punguza tovuti zinazofaa za kukata vimeng'enya ili kuwezesha ujumuishaji upya.c.Punguza urefu, kata vipande visivyo vya lazima, boresha ufanisi wa kuagiza na kuongeza uwezo wa upakiaji.d.Badilisha nakala, kutoka kwa kubana hadi isiyolegea, kutoka nakala chache hadi nakala zaidi.e.Ongeza vipengele maalum vya maumbile kulingana na mahitaji maalum ya uhandisi wa maumbile
4. Toa mfano wa mbinu ya uchunguzi tofauti wa cDNA maalum ya tishu?
Vikundi viwili vya seli hutayarishwa, jeni inayolengwa inaonyeshwa au kuonyeshwa sana katika seli moja, na jeni inayolengwa haijaonyeshwa au kuonyeshwa kwa kiwango cha chini katika seli nyingine, na kisha jeni inayolengwa hupatikana kwa mseto na kulinganisha.Kwa mfano, wakati wa kutokea na ukuzaji wa uvimbe, seli za uvimbe zitawasilisha mRNA zenye viwango tofauti vya kujieleza kuliko seli za kawaida.Kwa hiyo, jeni zinazohusiana na tumor zinaweza kuchunguzwa kwa kuchanganya tofauti.Mbinu ya introduktionsutbildning inaweza pia kutumika kuchuja jeni ambazo usemi wake umechochewa.
5. Kizazi na uchunguzi wa mistari ya seli ya hybridoma?
Seli za wengu B + seli za myeloma, ongeza polyethilini glikoli (kigingi) ili kukuza muunganisho wa seli, na seli za muunganisho wa wengu wa B-myeloma zilizopandwa katika HAT kati (iliyo na hypoxanthine, aminopterin, T) zinaendelea kupanua lishe.Mchanganyiko wa seli una: seli za muunganisho wa wengu-wengu: haziwezi kukua, seli za wengu haziwezi kukuzwa kwa usawa.Seli za muunganisho wa mfupa-mfupa: haziwezi kutumia hypoxanthine, lakini zinaweza kuunganisha purine kupitia njia ya pili kwa kutumia folate reductase.Aminopterin huzuia reductase ya folate na hivyo haiwezi kukua.Seli za mchanganyiko wa mfupa na wengu: zinaweza kukua katika HAT, seli za wengu zinaweza kutumia hypoxanthine, na seli za mfupa hutoa kazi ya mgawanyiko wa seli.
6. Je, ni kanuni na mbinu gani ya kuamua muundo wa msingi wa DNA kwa njia ya kukomesha terminal ya didioxy (njia ya Sanger)?
Kanuni ni kutumia kisimamizi cha mnyororo wa nyukleotidi—2,,3,-dideoxynucleotidi ili kukomesha upanuzi wa DNA.Kwa kuwa haina 3-OH inayohitajika kwa ajili ya kuundwa kwa vifungo vya 3/5/phosphodiester, mara baada ya kuingizwa kwenye mlolongo wa DNA, mlolongo wa DNA hauwezi kupanuliwa zaidi.Kulingana na kanuni ya kuoanisha msingi, wakati wowote DNA polymerase inapohitaji dNMP kushiriki katika mnyororo wa DNA uliopanuliwa kwa kawaida, kuna uwezekano mbili, moja ni kushiriki katika ddNTP, ambayo husababisha kusitishwa kwa upanuzi wa mnyororo wa deoxynucleotide;nyingine ni kushiriki katika dNTP , ili mnyororo wa DNA bado uweze kuendelea kupanuka hadi ddNTP inayofuata ijumuishwe.Kulingana na njia hii, kikundi cha vipande vya DNA vya urefu tofauti vinavyoishia ddNTP vinaweza kupatikana.Mbinu ni kugawanya katika vikundi vinne mtawalia ddAMP, ddGMP, ddCMP, na ddTMP.Baada ya majibu, polyacrylamide gel electrophoresis inaweza kusoma mlolongo wa DNA kulingana na bendi za kuogelea.
7. Ni nini athari chanya ya udhibiti wa protini ya kianzishaji (CAP) kwenye unukuzi?
Cyclic adenylate (cAMP) receptor protini CRP (cAMP receptor protini), changamano inayoundwa na mchanganyiko wa cAMP na CRP inaitwa CAP (cAMPactivated protini).E. koli inapokuzwa katika kiwango cha wastani cha kukosa glukosi, usanisi wa CAP huongezeka, na CAP huwa na kazi ya kuwezesha vikuzaji kama vile lactose (Lac).Baadhi ya wakuzaji wanaotegemea CRP hawana kipengele cha kawaida cha mfuatano wa eneo -35 (TTGACA) ambacho watangazaji wa kawaida wanacho.Kwa hiyo, ni vigumu kwa RNA polymerase kumfunga.Uwepo wa CAP (kazi): inaweza kuboresha kwa kiasi kikubwa ufungaji wa mara kwa mara wa kimeng'enya na kikuzaji.Hasa huonyesha vipengele viwili vifuatavyo: ① CAP husaidia molekuli ya kimeng'enya kuelekeza ipasavyo kwa kubadilisha muundo wa kikuzaji na mwingiliano na kimeng'enya, ili kuungana na eneo la -10 na kuchukua jukumu la kuchukua nafasi ya utendaji wa eneo -35.②CAP pia inaweza kuzuia ufungaji wa polimerasi ya RNA kwa tovuti zingine katika DNA, na hivyo kuongeza uwezekano wa kumfunga kipromota wake mahususi.
8. Ni hatua gani zinazojumuishwa katika jaribio la kawaida la ujumuishaji wa DNA?
a.Chambua jeni lengwa (au jeni la nje) la kiumbe wafadhili, na uunganishe kwa njia ya enzymatically kwenye molekuli nyingine ya DNA (cloning vector) ili kuunda molekuli mpya ya DNA recombinant.b.Hamisha molekuli recombinant ya DNA kwenye seli ya mpokeaji na uigaji na uihifadhi katika seli ya mpokeaji.Utaratibu huu unaitwa mabadiliko.c.Chunguza na utambue seli zile za wapokeaji ambazo zimefyonza DNA iliyounganishwa tena.d.Tamaduni kwa wingi seli zilizo na DNA recombinant ili kugundua kama jeni la msaada wa kigeni limeonyeshwa.
9. Ujenzi wa maktaba ya jeni Mbinu tatu za uchunguzi wa viambajengo zimetolewa na mchakato umeelezwa kwa ufupi.
Uchunguzi wa ukinzani wa viua vijasumu, uanzishaji wa ukinzani wa kuingizwa, uchunguzi wa doa-bluu-nyeupe au uchunguzi wa PCR, uchunguzi wa tofauti, uchunguzi wa DNA Vekta nyingi za cloning hubeba jeni sugu za viuavijasumu (anti-ampicillin, tetracycline).Wakati plasmid inapohamishwa kwenye Escherichia coli, bakteria watapata upinzani, na wale wasio na uhamisho hawatakuwa na upinzani.Lakini haiwezi kutofautisha ikiwa imepangwa upya au la.Katika vekta iliyo na jeni mbili za ukinzani, ikiwa kipande cha DNA cha kigeni kitaingizwa kwenye mojawapo ya jeni na kusababisha jeni kuzimwa, vidhibiti viwili vya sahani vilivyo na dawa tofauti vinaweza kutumika kuchungulia viunzi vilivyo chanya.Kwa mfano, plasmid ya pUC ina jeni la LacZ (encoding β-galactosidase), ambayo inaweza kuoza substrate ya chromogenic X-gal (5-bromo-4-chloro-3-indole-β-D-galactoside) kutoa bluu , hivyo kugeuza aina ya bluu.Wakati DNA ya kigeni inapoingizwa, jeni la LacZ haliwezi kuonyeshwa, na shida ni nyeupe, ili kuchunguza bakteria ya recombinant.
10. Eleza mchakato wa kimsingi wa kupata wanyama waliobadili maumbile kupitia seli shina za kiinitete?
Seli shina za kiinitete (ES) ni seli za kiinitete wakati wa ukuaji wa kiinitete, ambazo zinaweza kukuzwa na kuenezwa na kuwa na kazi ya kutofautisha katika aina zingine za seli.Utamaduni wa seli za ES: Wingi wa seli ya ndani ya blastocyst umetengwa na kukuzwa.ES inapokuzwa katika safu isiyo na malisho, itatofautiana katika seli mbalimbali zinazofanya kazi kama vile seli za misuli na N seli.Inapokuzwa katika kati iliyo na fibroblasts, ES itadumisha utendaji wa upambanuzi.ES inaweza kubadilishwa vinasaba, na kazi yake ya kutofautisha inaweza kuunganishwa bila kuathiri kazi yake ya kutofautisha, ambayo hutatua tatizo la ushirikiano wa random.Ingiza jeni za nje katika seli za shina za kiinitete, kisha zipandikizie kwenye uterasi ya panya jike wajawazito, hukua na kuwa watoto wa mbwa, na kuvuka ili kupata panya wa homozygous.