Seti ya ForeDirect RT-qPCR
Maelezo ya Kiti:
◮Kwa ukuzaji wa moja kwa moja wa wakati halisi wa RNA kutoka kwa makusanyo ya usufi bila michakato ya utakaso wa RNA.Seti hii hukamilisha mizunguko ya qRT-PCR ndani ya saa moja.Mchanganyiko wa kimeng'enya ni mchanganyiko ulioboreshwa wa Reverse Transcriptase, Hot-Start Taq DNA polymerase, RNase inhibitor.Kipengele cha Reaction Buffer kina vijenzi vyote vinavyohitajika, ikijumuisha vijenzi vya bafa vilivyoboreshwa, Mg2+, dUTP, na dNTPs.
Maelezo
ForeDirect RT-qPCR Kit imeundwa kwa ajili ya ukuzaji wa RNA moja kwa moja katika wakati halisi kutoka kwa makusanyo ya usufi bila michakato ya utakaso wa RNA.Seti hii hukamilisha mizunguko ya qRT-PCR ndani ya saa moja.Mchanganyiko wa kimeng'enya ni mchanganyiko ulioboreshwa wa Reverse Transcriptase, Hot-Start Taq DNA polymerase, RNase inhibitor.Kipengele cha Reaction Buffer kina vijenzi vyote vinavyohitajika, ikijumuisha vijenzi vya bafa vilivyoboreshwa, Mg2+, dUTP, na dNTPs.
Vipimo
100T
Vipengele vya kit
| Wakala wa kutolewa kwa asidi ya nyuklia |
| Kinga ya RNA |
| 2× RT-qPCR Buffer |
| Mchanganyiko wa Enzyme (Taq&M-MLV) |
| Maagizo |
Maombi ya PCR
1. Mara tu mirija ya athari ya PCR inapowekwa katikati kwa muda mfupi, ziweke kwenye tangi ya sampuli ya chombo cha ukuzaji.
2. Itifaki ya joto
| Hatua | Halijoto | Wakati | Mizunguko | |
| 1 | Unukuzi wa kinyume | 50℃ | Dakika 15 | 1 |
| 2 | Pre-denaturation | 95℃ | Dakika 1 | 1 |
| 3 | Denaturation | 95℃ | Sekunde 10 | 42 |
| 4 | Anneal/Ugani | 60 ℃ | Sekunde 30 | |
Kumbuka:Ishara ya fluorescent iligunduliwa mara moja baada ya hatua ya ugani ya kila mzunguko.
3. Baada ya kuweka, hifadhi faili na kuendesha programu ya majibu.
Hatua za Uendeshaji
Kabla ya maandalizi ya reagent, reagents zote katika kit lazima thawed kwenye joto la kawaida na kuchanganywa kwa upole.
Maandalizi ya reagent
1. Tayarisha Mchanganyiko wa Utoaji wa Asidi ya Nucleic
| Sehemu | Kiasi kwa Sampuli au Udhibiti |
| Wakala wa kutolewa kwa asidi ya nyuklia | 5μL |
| Kinga ya RNA | 0.5 μL |
2. Tayarisha Mchanganyiko wa Majibu
| Sehemu | Kiasi kwa Sampuli au Udhibiti |
| 2× RT-qPCR Buffer | 15 μL |
| Mchanganyiko wa Enzyme (Taq&M-MLV) | 1.5 μL |
| Primers na Probes | 1μL |
Uhifadhi na maisha ya rafu
-Kifaa kihifadhiwe saa -20± 5℃.Muda wa uhalali ni miezi 12.
-Epuka mizunguko ya kufungia mara kwa mara (<5 mizunguko).
