• facebook
  • zilizounganishwa
  • youtube
English
ukurasa_bango

Njia rahisi ya HS Taq DNA Polymerase

Picha Iliyoangaziwa ya HS Taq DNA Polymerase
  • Njia rahisi ya HS Taq DNA Polymerase

Maelezo ya Kiti:

◮Umaalumu wa hali ya juu: kimeng'enya chenye shughuli nyingi za kuanza moto.

◮Ukuzaji wa Haraka: 10 sec/kb.

◮Uwezo wa hali ya juu wa kiolezo : inaweza kutumika kukuza Juu kwa ufasahaGCthamaninaviolezo mbalimbali vya DNA ambavyo ni vigumu-kukuza.

◮Uaminifu dhabiti: Uaminifu ni mara 6of Enzyme ya kawaida ya Taq.

nguvu ya mbele


Maelezo ya Bidhaa

Lebo za Bidhaa

Maswali Yanayoulizwa Mara kwa Mara

Maelezo

Foreasy HS Taq DNA Polymerase ni kimeng'enya kipya cha Taq kinachoonyeshwa katika bakteria ya uhandisi ya Escherichia coli kwa teknolojia ya ujumuishaji wa jeni.Baada ya enzyme kutibiwa na mchakato maalum, ni's shughuli huzuiwa kabla ya kuwezesha joto, na hivyo kuzuia ukuzaji usio maalum unaosababishwa na annealing isiyo maalum ya primers au dimers ya primer chini ya hali ya chini ya joto.Bidhaa hii inafaa kwa PCR React mahususi sanaioni, M ultiple x PCR , maudhui ya juu ya GC (> 60%),namuundo wa sekondariau nyinginejeni kali ya usuliicsukuzaji na genom kwa kiwango kikubwaicsutambuzi wa ukuzaji.Kimeng'enya kina 5' → 3' DNA polymerase shughuli na 5' → 3' exonuclease shughuli, lakini hakuna 3' → 5' shughuli exonuclease.

Vipengele vya kit

Sehemu IM-01021 IM-01022 IM-01023
HS Taq DNA Polymerase (5 U/μL)  5000 U (mL 1)  KU 50 (mL 10)  KU 500 (mL 100)
2× Taq Reaction Buffer  25mL × 5  250 ml × 5  500 ml × 25

Vipengele&faida

- Umaalum wa hali ya juu: kimeng'enya chenye shughuli nyingi za kuanza moto.

- Ukuzaji wa Haraka: 10 sec/kb.

- Kubadilika kwa kiolezo cha hali ya juu: inaweza kutumika kukuza Juu kwa ufanisiGCthamaninaviolezo mbalimbali vya DNA ambavyo ni vigumu-kukuza.

- Uaminifu dhabiti: Uaminifu ni mara 6of Enzyme ya kawaida ya Taq.

Programu ya kit

- Mfumo mbalimbali wa PCR/qPCR na mfumo wa moja kwa moja wa PCR

- Sehemu ya DNA Iliyokuzwa ya PCR

- Alama ya DNA

- Mpangilio wa DNA

- PCR pamoja na mkia

Ufafanuzi wa Shughuli

1U : Kiasi cha kimeng'enya kinachohitajika kujumuisha nmol 10 zaDNAndani ya dutu isiyoyeyuka kwa asidi kwa kutumia DNA ya manii ya lax iliyoamilishwa kama kiolezo / primer, 74 °C, dakika 30.

Hali ya Mwitikio

Halijoto Wakati wa Majibu Muda wa mzunguko
37°C 5 dakika 1
94°C 5 dakika 1
94°C 10 Sek  40
60°C 10 Sek

Kumbuka:Kwa mifumo ya 10 µL na 20 µL, ongeza kiasi sawa cha mafuta ya madini ikiwa kiendesha mzunguko wa joto hakina mfuniko wa joto.

Masharti ya athari ya PCR hutofautiana kulingana na hali ya kimuundo ya violezo, vianzio, na kadhalika.Katika operesheni maalum, inahitajika kuunda hali bora za athari, pamoja na hali ya joto ya anneal, muda wa upanuzi, nk, kulingana na hali maalum kama vile aina ya kiolezo, saizi ya kipande kinacholengwa, mlolongo wa msingi wa kipande kilichokuzwa, na yaliyomo na urefu wa GC.

Hifadhi

-20 ± 5 °C kwa miaka 2 au -80 °C kwa uhifadhi wa muda mrefu.

  • Iliyotangulia:
  • Inayofuata:

    • Hakuna ishara za ukuzaji

    1.Taq DNA Polymerase kwenye kit hupoteza shughuli zake kutokana na uhifadhi usiofaa au kuisha muda wa kit.
    Pendekezo: Thibitisha hali ya uhifadhi wa kit;ongeza tena kiasi kinachofaa cha Taq DNA Polymerase kwenye mfumo wa PCR au ununue Kitengo kipya cha PCR cha Wakati Halisi kwa majaribio yanayohusiana.

    2.Kuna vizuizi vingi vya Taq DNA Polymerase kwenye kiolezo cha DNA.
    Pendekezo: Safisha kiolezo upya au upunguze kiasi cha kiolezo kilichotumiwa.

    3.Mkusanyiko wa Mg2+ haufai.
    Pendekezo: Mkusanyiko wa Mg2+ wa Mchanganyiko wa 2× Halisi wa PCR tunaotoa ni 3.5mM.Hata hivyo, kwa baadhi ya vitangulizi maalum na violezo, mkusanyiko wa Mg2+ unaweza kuwa wa juu zaidi.Kwa hivyo, unaweza kuongeza MgCl2 moja kwa moja ili kuboresha mkusanyiko wa Mg2+.Inapendekezwa kuongeza Mg2+ 0.5mM kila wakati kwa ajili ya uboreshaji.

    4.Masharti ya amplification ya PCR haifai, na mlolongo wa primer au mkusanyiko sio sahihi.
    Pendekezo: kuthibitisha usahihi wa mlolongo wa primer na primer haijaharibiwa;ikiwa ishara ya ukuzaji si nzuri, jaribu kupunguza joto la annealing na urekebishe mkusanyiko wa primer ipasavyo.

    5.Kiasi cha template ni kidogo sana au nyingi sana.
    Pendekezo: Tekeleza unyunyuzishaji wa kiolezo cha uwekaji mstari, na uchague mkusanyiko wa kiolezo chenye madoido bora ya PCR kwa jaribio la PCR la Saa Halisi.

    NTC ina thamani ya juu sana ya fluorescence

    1. Uchafuzi wa reagent unaosababishwa wakati wa operesheni.
    Pendekezo: Badilisha na vitendanishi vipya kwa majaribio ya PCR ya Wakati Halisi.

    2. Uchafuzi ulitokea wakati wa utayarishaji wa mfumo wa majibu ya PCR.
    Pendekezo: Chukua hatua muhimu za kinga wakati wa operesheni, kama vile: kuvaa glavu za mpira, kutumia ncha ya pipette na chujio, nk.

    3.The primers ni duni, na uharibifu wa primers itasababisha non-specific amplification.
    Pendekezo: Tumia electrophoresis ya SDS-PAGE ili kugundua kama vianzio vimeharibika, na ubadilishe na vitangulizi vipya kwa majaribio ya PCR ya Wakati Halisi.

    Primer dimer au ukuzaji usio maalum

    1.Mkusanyiko wa Mg2+ haufai.
    Pendekezo: Mkusanyiko wa Mg2+ wa Mchanganyiko wa 2× Halisi wa PCR EasyTM tunaotoa ni 3.5 mm.Hata hivyo, kwa baadhi ya vitangulizi maalum na violezo, mkusanyiko wa Mg2+ unaweza kuwa wa juu zaidi.Kwa hivyo, unaweza kuongeza MgCl2 moja kwa moja ili kuboresha mkusanyiko wa Mg2+.Inapendekezwa kuongeza Mg2+ 0.5mM kila wakati kwa ajili ya uboreshaji.

    2.Kiwango cha joto cha PCR ni cha chini sana.
    Pendekezo: Ongeza halijoto ya kupenyeza ya PCR kwa 1℃ au 2℃ kila wakati.

    3.Bidhaa ya PCR ni ndefu sana.
    Pendekezo: Urefu wa bidhaa ya Muda Halisi ya PCR unapaswa kuwa kati ya 100-150bp, isizidi 500bp.

    4.The primers ni kuharibiwa, na uharibifu wa primers itasababisha kuonekana kwa amplification maalum.
    Pendekezo: Tumia electrophoresis ya SDS-PAGE ili kugundua kama vianzio vimeharibika, na ubadilishe na vitangulizi vipya kwa majaribio ya PCR ya Wakati Halisi.

    5.Mfumo wa PCR haufai, au mfumo ni mdogo sana.
    Pendekezo: Mfumo wa majibu ya PCR ni mdogo sana utasababisha usahihi wa utambuzi kupungua.Ni bora kutumia mfumo wa maitikio unaopendekezwa na kifaa cha kiasi cha PCR ili kutekeleza tena jaribio la Muda Halisi la PCR.

    Kurudiwa duni kwa thamani za kiasi

    1.Kifaa hakifanyi kazi.
    Pendekezo: Kunaweza kuwa na hitilafu kati ya kila shimo la PCR la kifaa, na kusababisha uzalishwaji duni wakati wa kudhibiti halijoto au utambuzi.Tafadhali angalia kulingana na maagizo ya chombo husika.

    2.Sampuli ya usafi sio nzuri.
    Pendekezo: Sampuli chafu zitasababisha uzalishwaji duni wa jaribio, unaojumuisha usafi wa kiolezo na vianzio.Ni bora kusafisha kiolezo, na vitangulizi vinatakaswa vyema na SDS-PAGE.

    3.Maandalizi ya mfumo wa PCR na muda wa kuhifadhi ni mrefu sana.
    Pendekezo: Tumia mfumo wa PCR wa Wakati Halisi kwa majaribio ya PCR mara tu baada ya kutayarisha, na usiuache kando kwa muda mrefu sana.

    4.Masharti ya amplification ya PCR haifai, na mlolongo wa primer au mkusanyiko sio sahihi.
    Pendekezo: kuthibitisha usahihi wa mlolongo wa primer na primer haijaharibiwa;ikiwa ishara ya ukuzaji si nzuri, jaribu kupunguza joto la annealing na urekebishe mkusanyiko wa primer ipasavyo.

    5.Mfumo wa PCR haufai, au mfumo ni mdogo sana.
    Pendekezo: Mfumo wa majibu ya PCR ni mdogo sana utasababisha usahihi wa utambuzi kupungua.Ni bora kutumia mfumo wa maitikio unaopendekezwa na kifaa cha kiasi cha PCR ili kutekeleza tena jaribio la Muda Halisi la PCR.

    Andika ujumbe wako hapa na ututumie

    KuhusianaBidhaa

    Gonga ingiza ili kutafuta au ESC ili kufunga