Mtengenezaji wa China wa 2× Premix Iliyokolezwa kwa Sampuli Isiyosafishwa ya Muda Halisi Kiasi cha PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U
Shirika linaendelea na dhana ya utaratibu "usimamizi wa kisayansi, ubora wa juu na ubora wa ufanisi, mnunuzi mkuu kwa Mtengenezaji wa China kwa 2× Concentrated Premix kwa Sampuli Isiyosafishwa ya Muda Halisi wa PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U, Biashara yetu imejitolea kuwapa wateja muhimu na salama bidhaa za ubora wa juu kwa kila bei ya juu na ya fujo.
Shirika linaendelea na dhana ya utaratibu "usimamizi wa kisayansi, ubora wa juu na ubora wa ufanisi, mnunuzi mkuu waChina Taq DNA Polymerase na Qpcr, Kampuni yetu ina nguvu nyingi na ina mfumo thabiti na kamilifu wa mtandao wa mauzo.Tunatamani tungeweza kuanzisha uhusiano mzuri wa kibiashara na wateja wote kutoka nyumbani na nje ya nchi kwa msingi wa faida za pande zote.
Kanuni za muundo wa primer ya Muda Halisi ya PCR
Sambaza Kitangulizi na Kitangulizi cha Nyuma
Kwa PCR ya Wakati Halisi, muundo wa primer ni muhimu sana.Viunzilishi vinahusiana na umaalum na ufanisi wa ukuzaji wa PCR, na vinaweza kuundwa kwa kuzingatia kanuni zifuatazo:
- Urefu wa primer: 18-30bp.
- Maudhui ya GC: 40-60%.
- Thamani ya Tm: Programu ya usanifu wa primer, kama vile Primer 5, inaweza kutoa thamani ya Tm ya kitangulizi.Thamani za Tm za vianzilishi vya juu na chini zinapaswa kuwa karibu iwezekanavyo.Fomula ya hesabu ya Tm pia inaweza kutumika: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Wakati wa kutekeleza PCR, halijoto iliyo chini ya thamani ya primer Tm ya 5 °C kwa ujumla huchaguliwa kama halijoto ya kuchuja (ongezeko linalolingana la halijoto ya kuchubua kunaweza kuongeza umaalum wa mmenyuko wa PCR).
- Primers na bidhaa za PCR:
- Urefu wa bidhaa ya ukuzaji wa kitangulizi cha PCR ni ikiwezekana 100-150bp.
- Vipimo vya uundaji katika eneo la sekondari la muundo wa kiolezo vinapaswa kuepukwa iwezekanavyo.
- Epuka uundaji wa besi 2 au zaidi zinazosaidiana kati ya ncha 3′ za vianzio vya juu na vya chini vya mkondo.
- Msingi wa msingi wa 3′ hauwezi kuwepo na G au C 3 za ziada mfululizo.
- The primers wenyewe hawezi kuwa na miundo ya ziada, vinginevyo muundo wa hairpin utaundwa, unaoathiri amplification ya PCR.
- ATCG inapaswa kusambazwa kwa usawa iwezekanavyo katika mfuatano wa kwanza, na msingi wa 3′ unapaswa kuepukwa kama T.
Nyongeza1:Cmoja kwa mojaRT-qPCR Sehemu ya vifaat nyongeza pakiti
1.Kiini Lysis Solution
Suluhisho la Lysis ya seli | |||
Vipengele vya kit (mfumo wa 24 wa kisima / kisima) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
SehemuI | Bafa CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Bafa ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
SehemuII | Kifutio cha DNA | 400 μl | 1 ml × 2 |
Mchanganyiko wa RT | |
Vipengele vya kit (Mfumo wa majibu ya 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Mchanganyiko wa RT wa moja kwa moja | 800 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7 ml × 2 |
Mchanganyiko wa qPCR | ||
Vipengele vya kit (Mfumo wa majibu ya 20 μl) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Moja kwa moja qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1.7 ml × 6 |
20× ROX Reference Dye | 40 μl | 200 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7 ml | 10 ml |
Shirika linaendelea na dhana ya utaratibu "usimamizi wa kisayansi, ubora wa juu na ubora wa ufanisi, mnunuzi mkuu kwa Mtengenezaji wa China kwa 2× Concentrated Premix kwa Sampuli Isiyosafishwa ya Muda Halisi wa PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U, Biashara yetu imejitolea kuwapa wateja muhimu na salama bidhaa za ubora wa juu kwa kila bei ya juu na ya fujo.
China Mtengenezaji kwaChina Taq DNA Polymerase na Qpcr, Kampuni yetu ina nguvu nyingi na ina mfumo thabiti na kamilifu wa mtandao wa mauzo.Tunatamani tungeweza kuanzisha uhusiano mzuri wa kibiashara na wateja wote kutoka nyumbani na nje ya nchi kwa msingi wa faida za pande zote.
Kanuni za muundo wa primer ya Muda Halisi ya PCR
Sambaza Kitangulizi na Kitangulizi cha Nyuma
Kwa PCR ya Wakati Halisi, muundo wa primer ni muhimu sana.Viunzilishi vinahusiana na umaalum na ufanisi wa ukuzaji wa PCR, na vinaweza kuundwa kwa kuzingatia kanuni zifuatazo:
- Urefu wa primer: 18-30bp.
- Maudhui ya GC: 40-60%.
- Thamani ya Tm: Programu ya usanifu wa primer, kama vile Primer 5, inaweza kutoa thamani ya Tm ya kitangulizi.Thamani za Tm za vianzilishi vya juu na chini zinapaswa kuwa karibu iwezekanavyo.Fomula ya hesabu ya Tm pia inaweza kutumika: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Wakati wa kutekeleza PCR, halijoto iliyo chini ya thamani ya primer Tm ya 5 °C kwa ujumla huchaguliwa kama halijoto ya kuchuja (ongezeko linalolingana la halijoto ya kuchubua kunaweza kuongeza umaalum wa mmenyuko wa PCR).
- Primers na bidhaa za PCR:
- Urefu wa bidhaa ya ukuzaji wa kitangulizi cha PCR ni ikiwezekana 100-150bp.
- Vipimo vya uundaji katika eneo la sekondari la muundo wa kiolezo vinapaswa kuepukwa iwezekanavyo.
- Epuka uundaji wa besi 2 au zaidi zinazosaidiana kati ya ncha 3′ za vianzio vya juu na vya chini vya mkondo.
- Msingi wa msingi wa 3′ hauwezi kuwepo na G au C 3 za ziada mfululizo.
- The primers wenyewe hawezi kuwa na miundo ya ziada, vinginevyo muundo wa hairpin utaundwa, unaoathiri amplification ya PCR.
- ATCG inapaswa kusambazwa kwa usawa iwezekanavyo katika mfuatano wa kwanza, na msingi wa 3′ unapaswa kuepukwa kama T.
Nyongeza1:Cmoja kwa mojaRT-qPCR Sehemu ya vifaat nyongeza pakiti
1.Kiini Lysis Solution
Suluhisho la Lysis ya seli | |||
Vipengele vya kit (mfumo wa 24 wa kisima / kisima) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
SehemuI | Bafa CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Bafa ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
SehemuII | Kifutio cha DNA | 400 μl | 1 ml × 2 |
Mchanganyiko wa RT | |
Vipengele vya kit (Mfumo wa majibu ya 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Mchanganyiko wa RT wa moja kwa moja | 800 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7 ml × 2 |
Mchanganyiko wa qPCR | ||
Vipengele vya kit (Mfumo wa majibu ya 20 μl) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Moja kwa moja qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1.7 ml × 6 |
20× ROX Reference Dye | 40 μl | 200 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7 ml | 10 ml |
Miongozo ya Maagizo: