Seti ya Kutengwa ya RNA ya Damu
Maelezo ya Kiti:
Paka.Nambari.RE-04011/04013
Kwa utakaso kamili wa RNA kutoka kwa damu nzima 104 ≤ Seli nyeupe za damu ≤ 107
Haraka kutenga na kusafisha damu RNA kutoka seli nyeupe za damu.
-Hakuna haja ya kuwa na wasiwasi juu ya uharibifu wa RNA.Seti nzima haina RNase
-Rahisi-shughuli zote hukamilishwa kwa joto la kawaida
-Haraka-operesheni inaweza kukamilika kwa dakika 20
-Mavuno ya juu ya RNA: Safu wima ya RNA pekee na fomula ya kipekee inaweza kusafisha RNA kwa ufanisi
-Salama-hakuna kitendanishi kikaboni kinachotumika
-Uwezo mkubwa wa usindikaji wa sampuli-hadi sampuli 200μl zinaweza kuchakatwa kila wakati.
-Ubora wa juu—RNA iliyosafishwa ni safi sana, haina protini na uchafu mwingine, na inaweza kukidhi matumizi mbalimbali ya majaribio ya chini ya mkondo.
Maelezo
Seti hii inachukua safu wima ya mzunguko na fomula iliyotengenezwa na kampuni yetu, ambayo inaweza kutoa RNA ya hali ya juu na ya ubora wa juu kutoka kwa damu nzima isiyoganda.Seti hii hutoa lysate ya seli nyekundu za damu (Buffer RCL), ambayo inaweza kusambaza seli nyekundu za damu kwa haraka na kwa ufanisi na kuhifadhi seli nyeupe za damu.Safu bora ya Kusafisha ya DNA inaweza kutenganisha kiunga cha juu zaidi na seli za seli na kutangaza na kuondoa DNA ya jenomu.Operesheni ni rahisi na inaokoa wakati;Safu wima ya RNA pekee inaweza kuunganisha RNA kwa ufanisi, na kwa fomula ya kipekee, inaweza kuchakata idadi kubwa ya sampuli kwa wakati mmoja.
Mfumo mzima wa RNase-Free hufanya RNA iliyotolewa isiharibike;Buffer RW1 na Buffer RW2 mfumo wa kuosha bafa hufanya RNA iliyopatikana kutokuwa na protini, DNA, ayoni na uchafuzi wa misombo ya kikaboni.
Yaliyomo kwenye Vifaa
| Seti ya Kutengwa kwa Jumla ya RNA ya Damu | ||
| Muundo wa vifaa | RE-04011 | RE-04013 |
| Mara 50 | Mara 200 | |
| Bafa RCL (10×) | 52.5 ml | 210mL |
| Bafa BRL1* | 30 ml | 120mL |
| Bafa BRL2 | 18mL | 66 ml |
| Bafa RW1* | 25mL | 100mL |
| Bafa RW2 | 24mL | 96 ml |
| RNase-Free ddH2 O | 10 ml | 40 ml |
| Safu ya RNA pekee | 50 seti | 200 seti |
| Safu ya Kusafisha ya DNA | 50 seti | 200 seti |
| mwongozo | nakala 1 | nakala 1 |
Vipengele&faida
-Hakuna haja ya kuwa na wasiwasi juu ya uharibifu wa RNA.Seti nzima haina RNase-Free.
-Rahisi-shughuli zote hukamilishwa kwa joto la kawaida.
-Haraka-operesheni inaweza kukamilika kwa dakika 20.
-Mavuno ya juu ya RNA: Safu wima ya RNA pekee na fomula ya kipekee inaweza kusafisha RNA kwa ufanisi.
-Salama-hakuna kitendanishi kikaboni kinachotumika.
-Uwezo mkubwa wa usindikaji wa sampuli-hadi sampuli 200μl zinaweza kuchakatwa kila wakati.
-Ubora wa juu—RNA iliyosafishwa ni safi sana, haina protini na uchafu mwingine, na inaweza kukidhi matumizi mbalimbali ya majaribio ya chini ya mkondo.
Vigezo vya kit
Programu ya kit:
Inafaa kwa uchimbaji na utakaso wa jumla wa RNA kutoka kwa damu nzima ya mamalia.
Mtiririko wa kazi
Masharti ya kuhifadhi
Buffer RCL (10×) inapaswa kuhifadhiwa kwa 2-8 ℃;vipengele vingine vya kit vinaweza kuhifadhiwa kwenye joto la kawaida (15-25 ℃) chini ya hali kavu, na vinaweza kuhifadhiwa kwa muda wa miezi 12.Buffer BRL1 inaweza kuhifadhiwa kwa 4 ℃ kwa mwezi 1 baada ya kuongeza β-mercaptoethanol (si lazima) .
Kumbuka: Ikiwa imehifadhiwa kwa joto la chini, suluhisho linaweza kukabiliwa na mvua.Hakikisha kuweka suluhisho kwenye kit kwenye joto la kawaida kwa muda kabla ya matumizi.Ikiwa ni lazima, joto katika umwagaji wa maji wa 37 ° C kwa dakika 10 ili kufuta mvua, na kuchanganya vizuri kabla ya matumizi.
Miongozo ya uchambuzi wa shida
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
Hakuna RNA inayoweza kutolewa au mavuno ya asidi ya nucleic ni ya chini
Kwa kawaida kuna mambo mengi yanayoathiri ufanisi wa urejeshaji, kama vile: sampuli ya maudhui ya RNA, njia ya uendeshaji, sauti ya kufafanua, n.k..
Uchambuzi wa sababu za kawaida:
1. Umwagaji wa barafu au joto la chini (4 ° C) centrifugation wakati wa operesheni.
Pendekezo: Joto la chumba (15-25 ° C) operesheni, kamwe umwagaji wa barafu na centrifuge ya joto la chini.
2. Uhifadhi usiofaa wa sampuli au uhifadhi wa sampuli kwa muda mrefu sana.
Pendekezo: Hifadhi sampuli kwa -80 ° C au zigandishe kwenye nitrojeni ya kioevu, na uepuke matumizi ya kufungia mara kwa mara;jaribu kutumia sampuli mpya zilizokusanywa kwa uchimbaji wa RNA.
3.Uchambuzi wa sampuli usiotosha
Pendekezo: Tafadhali hakikisha kwamba sampuli na suluhisho la kufanya kazi (Linear Acrylamide) vimechanganywa vizuri na kuangaziwa kwa dakika 10 kwenye joto la kawaida (15-25 ° C)
4. Kielelezo kiliongezwa kimakosa
Pendekezo: Hakikisha kuwa RNase-Free ddH2O imeongezwa katikati ya utando wa safu wima ya utakaso.
5.Kiasi kisichofaa cha ethanoli isiyo na maji katika Buffer viRW2
Pendekezo: Tafadhali fuata maagizo, ongeza kiasi sahihi cha ethanoli isiyo na maji kwenye Buffer viRW2 na uchanganye vizuri kabla ya kutumia kit.
6.Matumizi yasiyofaa ya sampuli.
Pendekezo: 200µl ya sampuli kwa 500μl ya Buffer viRL.Kiwango cha sampuli kupita kiasi kitasababisha kupunguza kasi ya uchimbaji wa RNA.
7.Ujazo usiofaa wa kufichua au ufinyu usio kamili.
Pendekezo: Kiasi kisichojulikana cha safu ya utakaso ni 30-50μl;ikiwa athari ya elution hairidhishi, inashauriwa kuongeza ddH isiyo na joto ya RNase-Free.2O na kuongeza muda wa kuweka kwenye joto la kawaida, kama vile 5-10min
8. Safu wima ya utakaso ina mabaki ya ethanoli baada ya kusuuza kwenye Buffer viRW2.
Pendekezo: Iwapo ethanoli bado itasalia baada ya kusuuza katika Buffer viRW2 na upenyezaji wa mirija tupu kwa dakika 2, safu wima ya utakaso inaweza kuachwa kwenye joto la kawaida kwa dakika 5 baada ya kupenyeza kwa mrija tupu ili kuondoa kikamilifu ethanoli iliyobaki.
Uharibifu wa molekuli za RNA zilizosafishwa
Ubora wa RNA iliyosafishwa unahusiana na vipengele kama vile hifadhi ya sampuli, uchafuzi wa RNase na uendeshaji.
Uchambuzi wa sababu za kawaida:
1.Sampuli zilizokusanywa hazikuhifadhiwa kwa wakati.
Pendekezo: Ikiwa sampuli haitatumiwa kwa wakati baada ya kukusanywa, tafadhali ihifadhi kwa -80 ℃ au nitrojeni kioevu mara moja.Kwa uchimbaji wa molekuli za RNA, jaribu kutumia sampuli mpya zilizokusanywa kila inapowezekana.
2.Sampuli zilizokusanywa zilikuwa zikiganda na kuyeyushwa mara kwa mara.
Pendekezo: Epuka kufungia mara kwa mara na kuyeyusha (si zaidi ya mara moja) wakati wa kukusanya na kuhifadhi sampuli, vinginevyo mavuno ya asidi ya nucleic yatapungua.
3.RNase ilianzishwa katika chumba cha uendeshaji au hakuna glavu za kutosha, masks, nk.
Pendekezo: Uchimbaji wa jaribio la molekuli za RNA hufanywa vyema zaidi katika chumba tofauti cha utendakazi cha RNA, na jedwali la majaribio husafishwa kabla ya jaribio.Vaa glavu na vinyago vinavyoweza kutupwa wakati wa jaribio ili kuepuka uharibifu wa RNA unaosababishwa na utangulizi wa RNase.
4.Kitendanishi kimechafuliwa na RNase wakati wa matumizi.
Pendekezo: Badilisha na Viral RNA Isolation Kit mpya kwa majaribio yanayohusiana.
5. Uchafuzi wa RNase wa mirija ya katikati, vidokezo vya bomba, n.k. Pendekezo: Hakikisha kwamba mirija ya katikati, vidokezo vya bomba, na bomba zote hazina RNase.
Molekuli za RNA zilizosafishwa ziliathiri majaribio ya chini ya mkondo
Molekuli za RNA zilizosafishwa kwa safu wima ya utakaso zitaathiri majaribio ya mkondo wa chini ikiwa kuna ayoni au protini nyingi za chumvi, kama vile: unukuzi wa kinyume, Northern Blot, n.k..
1.Kuna ioni za chumvi zilizosalia katika molekuli za RNA zilizotolewa.
Pendekezo: Hakikisha kwamba kiasi sahihi cha ethanoli isiyo na maji kimeongezwa kwenye Buffer viRW2, na uoshe safu ya utakaso mara mbili kulingana na kasi sahihi ya kupenyeza kwenye maagizo ya uendeshaji; Ikiwa bado kuna ioni za chumvi zilizobaki, unaweza kuongeza Buffer viRW2 kwenye safu ya utakaso, na kuiacha kwenye joto la kawaida kwa dakika 5.Kisha fanya centrifugation ili kuondoa uchafuzi wa ioni za chumvi kwa kiwango kikubwa
2.Kuna ethanoli iliyobaki katika molekuli za RNA zilizotolewa
Pendekezo: mara tu unapothibitisha kuwa safu wima za utakaso zimeoshwa na Buffer viRW2, fanya uingizaji hewa wa bomba tupu kulingana na kasi ya centrifugal kwenye maagizo ya uendeshaji.Ikiwa bado kuna ethanol iliyobaki, inaweza kushoto kwa dakika 5 kwa joto la kawaida baada ya centrifugation ya tube tupu ili kuondoa ethanol iliyobaki kwa kiwango kikubwa zaidi.
Miongozo ya Maagizo:
Mwongozo wa Maagizo ya Vifaa vya Kutengwa vya RNA ya Virusi
-
Seti ya Kutenga ya DNA ya FFPE ya Uchimbaji wa DNA Purifica...
-
Genomic DNA Micro Kit Micro Genomic DNA Mini Kit
-
Seli Jumla ya Seli ya Kutenga ya RNA Jumla ya RNA Isolatio...
-
Mfumo wa Kitambulisho cha Foregene DNA 30 AC (Kesi)
-
Uchunguzi wa BCR ABL1 wa Rangi Mbili wa Fusion
-
D7S522/CSP7 Uchunguzi wa Rangi Mbili
