Mbinu za PCR na uchafuzi wa erosoli ya asidi nucleiki katika maabara za kupima asidi ya nukleiki ni kama pande mbili za sarafu.Tunaweza tu kuchagua kuwa nayo au kutokuwa nayo, lakini hatuwezi kuchagua ikiwa tunaitaka au kuitumia.

1. Uchunguzi wa kiondoa DNA

Ili kufikia uondoaji wa anga wa uchafuzi wa erosoli ya asidi ya nucleic, kwanza ni muhimu kuchunguza viondoa DNA ambavyo vinaweza kuondoa asidi ya nucleic katika hali ya kioevu.Kwa sababu hakuna viondoa DNA vingi vinavyofanya kazi kweli.Kwa njia ya majaribio, tafadhali rejelea: Mtoaji wa DNA hawezi kuwa "kona ya siri" ya maabara!

Katika jaribio hili, nakala 100/μL (CT takriban 31) za plasmid ya ASFV na kiondoa DNA kilichohesabiwa na PCR ya dijiti zilichanganywa kwa viwango sawa, na kisha kujibu kwa joto la kawaida kwa 10min, 20min na 30min mtawalia.Baada ya uchimbaji wa asidi ya nucleic, ukuzaji wa qPCR ulifanyika.Udhibiti mzuri uliochanganywa na plasmid na maji ulilinganishwa.Kwa kuwa jaribio halijakamilika kwa wakati mmoja, kunaweza kuwa na kupotoka fulani kati ya matokeo, lakini haiathiri hitimisho la jaribio.Kufikia sasa, nimetathmini bidhaa 10 za kiondoa DNA za kibiashara.Nambari 1 tu, Nambari ya 6 na Nambari ya 8 inaweza kuharibu DNA ya plasmid katika hali ya kioevu.Bidhaa zingine karibu hazina athari.

Jedwali 1 Athari ya kuondolewa kwa asidi ya nyuklia ya kiondoa DNA kinachopatikana kibiashara

2. Majaribio ya athari ya uondoaji wa DNA ya viuavidudu vinavyotumika kawaida

1. Uchunguzi wa disinfectants kutumika kawaida

Kuna aina nyingi za dawa za kuua viini zinazotumiwa sana katika maabara: aldehidi, phenoli, alkoholi, chumvi za amonia ya quaternary, peroxides, maandalizi ya klorini, na asidi na besi.Athari za disinfection ya disinfectants hizi kwenye microorganisms zimethibitishwa kikamilifu na majaribio, lakini Hakuna data ya kutosha ya majaribio juu ya athari ya uharibifu wa asidi nucleic.Maabara ya kupima asidi ya nyuklia yanahitaji disinfectant ambayo sio tu ina athari nzuri ya disinfection kwa microorganisms, lakini pia inaweza kuharibu DNA.Matokeo ya majaribio yanaonyesha kuwa matayarisho mawili tu ya klorini ya 84 disinfectant na trichloroisocyanuric acid na 1 M hidrokloric acid yanakidhi mahitaji.Kwa kuwa asidi hidrokloriki ya 1 M husababisha ulikaji sana, inashauriwa kuwa matayarisho ya klorini yatumike kama utupaji taka katika maabara za kupima asidi ya nukleiki.Hata hivyo, maandalizi ya klorini ni babuzi kwa metali na hayawezi kutumika kwa disinfection ya vyombo na vifaa.

Jedwali 2 madhara ya kuondolewa kwa DNA ya aina tofauti za disinfectants

2. Mkusanyiko wa chini wa ufanisi wa maandalizi ya klorini

Dawa za kuua vijidudu zinazotokana na klorini zina athari kubwa ya uharibifu wa DNA, lakini kwa sababu ya ukali wa chuma na kuwasha, zinaweza kutumika kusafisha sakafu, countertops zisizo za chuma, vidokezo vya kuloweka, mirija ya centrifuge na vitu vingine vya majaribio.

Kulingana na "Mwongozo wa Kitaalamu wa Ugonjwa wa Ugonjwa wa Nimonia Mpya": Vichafuzi (damu ya wagonjwa, majimaji na matapishi) inapatikana klorini 5g/L-10g/L disinfectant yenye klorini;sakafu, kuta, na nyuso za vitu hutumia klorini inayopatikana 1g/L Kiuavitilifu cha klorini: nguo, matandiko na nguo nyingine hulowekwa kwanza kwenye dawa ya klorini na klorini 0.5g/L inapatikana kwa dakika 30, na kisha kusafishwa kama kawaida.

Jedwali la 3 athari ya kuondolewa kwa DNA ya viwango tofauti vya dawa ya klorini

Matokeo ya majaribio yanaonyesha kuwa: wakati ukolezi mzuri wa klorini ni mkubwa kuliko au sawa na 1.2 g/L, kiua viuatilifu kilicho na klorini kinaweza kuharibu kabisa plasmid 100/μL kinapotumiwa kwa dakika 5.Wakati wa kufanya kazi kwa dakika 10, dawa 84 za kuua vijidudu zenye ukolezi bora wa klorini zaidi ya au sawa na 0.6 g/L zinaweza kuharibu kabisa nakala 100/μL za plasmidi.

3. Jaribio la kuondoa hewa iliyochafuliwa na erosoli ya asidi ya nukleiki

Jinsi ya kusafisha hewa iliyochafuliwa na erosoli za asidi ya nucleic?Mawazo mengi ni kuunda mazingira yenye uchafu wa erosoli na kisha kuisafisha, au kusafisha asidi ya nucleic baada ya uchafuzi.Kwangu mimi, jaribio ambalo haliwezi kurudiwa na matokeo ya jaribio hayawezi kuchambuliwa kwa kiasi haina maana, kwa hiyo nilikopa baadhi ya mbinu za disinfection hewa hewa.Tazama "Masharti ya Jumla ya GB27948-2020 kwa Viua viua viuatilifu vya Hewa" na "Ainisho za Kiufundi za Kusafisha"

1. Nyenzo za mtihani

1.1 Kiondoa DNA: Katika jaribio hili, viondoa DNA viwili vinavyopatikana kibiashara 6 na 8 kwenye Jedwali 1 vilichaguliwa.

1.2 Plamini ya majaribio: Kwa kuzingatia kwamba thamani ya CT ya uchafuzi mwingi wa maabara itakuwa kubwa kuliko 30, mkusanyiko wa plasmid ya jeni ya ASFV inayotumiwa wakati huu ni takriban nakala 100/μL, na kiasi cha umeme cha PCR CT ni takriban 31.07.Ongeza plasmid kwenye swab ya pamba inayozunguka na kavu hewa.

1.3 Zana ya kufanyia majaribio: Chombo cha kuua viini cha Bilingkehan KVBOX, ambacho kinaungwa mkono kwa ukarimu na Shenzhen Runlian Environmental Technology Co., Ltd., kina utendaji bora wa kuua hewa kwa kutumia dawa ya peroksidi ya hidrojeni, na kinaweza kuua spora na vijidudu vingine.

1.4 Nafasi ya majaribio: dirisha la uhamisho lililofungwa la takriban mita za ujazo 0.1.

2. Mbinu ya mtihani

Kiasi cha disinfectant kilichowekwa kwenye mashine ya disinfection ni 10ml, na mkusanyiko ni 100ml/m3, ambayo ni ya juu zaidi kuliko "GB27948-2020 Mahitaji ya Jumla ya Viua viua viuatilifu vya Hewa": wakati wa kutumia disinfection ya dawa ya erosoli, kiasi cha disinfectant kinapaswa kuwa ≤10 ml/m3.