Upimaji wa kimaabara huanza na ukusanyaji wa sampuli, na ukusanyaji wa sampuli ndio rahisi zaidi kupuuzwa.Jambo muhimu zaidi kwa mkusanyiko wa sampuli ni kuchagua aina sahihi ya sampuli, kutumia zana zinazofaa za sampuli, na kufanya usafirishaji na usindikaji unaofaa.

I. Aina ya sampuli

Aina za sampuli za kawaida ni kama ifuatavyo.

Njia ya sampuli inaweza kurejelea maelezo ya kiufundi ya ufuatiliaji wa mazingira wa coronavirus mpya katika soko la biashara ya kilimo (bazaar)":

1. Sampuli za usufi kutoka kwa pamba za koo, mikono, nguo na vitu vingine vya watendaji: inahitajika kutumia suluhisho la uhifadhi wa virusi kwenye bomba la sampuli za virusi na kupenyeza kikamilifu swabs za pamba za sampuli.Uso wa ardhi) hutumiwa mara kwa mara na kuoshwa kwa zaidi ya mara 3.Wakati huo huo, ni muhimu kufanya sampuli nyingi za kusambazwa kwenye uso wa kitu kilichopigwa.

2. Sampuli za uso wa chakula: Sampuli za chakula haziwezi kukusanywa moja kwa moja.Chakula kitakachokusanywa kitenganishwe kwa uangalifu na kuhifadhiwa kwenye mfuko safi wa sampuli kabla ya kukusanya sampuli za usufi.Inahitajika kutumia suluhisho la uhifadhi wa virusi kwenye bomba la sampuli ya virusi, baada ya kuloweka kikamilifu pamba ya sampuli, kupaka mara kwa mara na suuza uso wa sampuli ya chakula inayokusanywa zaidi ya mara 3.Wakati huo huo, ni muhimu kufanya sampuli nyingi za kusambazwa kwenye uso wa sampuli.

3. Sampuli za maji taka: Kulingana na usambazaji wa mfumo wa mifereji ya maji kwenye soko, chagua maeneo 2-3 ya sampuli za maji taka, ukizingatia mkusanyiko wa mtandao wa bomba la ndani, chini ya mwelekeo wa mtiririko wa maji, au uunganisho na mtandao wa bomba la manispaa.Ili kukusanya sampuli ya usufi, itumbukize ndani ya maji taka na usufi wa pamba wa sampuli ili kuifanya ivutie maji taka na kuisafisha kwenye bomba la sampuli zaidi ya mara 3.Kukusanya sampuli za maji taka, tumia chupa za plastiki za polyethilini kukusanya sampuli za maji ya maji taka 30-500 mL;kwa ukusanyaji wa maji taka yenye ujazo zaidi ya 500 ml, ndoo za plastiki za polyethilini au vifaa maalum vya urutubishaji vya maji kwenye tovuti vinaweza kutumika.Wakati huo huo, ni muhimu kufanya sampuli nyingi za kusambazwa kwa eneo la sampuli za maji taka.

4. Sampuli za wanyama: Kwa wanyama hai, swabs za sampuli zinaweza kutumika kukusanya swabs za uso wa mwili, swabs za oropharyngeal na mkundu, na sampuli za kinyesi au ute zinaweza kukusanywa na kurekodiwa ipasavyo kwenye karatasi ya kumbukumbu.Kwa sampuli za wanyama ambao wamechunwa ngozi, n.k., tumia usufi wa pamba kukusanya uso wa miili yao na sampuli za usufi wa matundu ya mwili.Inahitajika kutumia suluhisho la kuhifadhi virusi kwenye bomba la sampuli za virusi ili kupenyeza kikamilifu kwenye pamba ya sampuli, na kisha kurudia uwekaji wa uso wa sampuli ya chakula kitakachokusanywa.Shabu zaidi ya mara 3.Wakati huo huo, ni muhimu kufanya sampuli nyingi za kusambazwa kwenye uso wa sampuli.

5. Vyombo vingine: vyombo vya kusafirisha na kuzalishia wanyama kama vile vizimba au matangi ya samaki.Kwanza, chunguza au uelewe aina mahususi za wanyama waliohifadhiwa na kufugwa kwenye chombo, na kukusanya sampuli za usufi kwenye ukuta wa ndani wa chombo au sampuli za kioevu za yaliyomo.

6.Kusanya sampuli za erosoli katika maeneo ambayo watu hukusanyika, maeneo ya biashara ya mahali ambayo hayana hewa ya kutosha, ofisi na vyumba vya kupumzika.

II.Zana za sampuli
1. Bomba la kukusanya damu
Ikiwa unahitaji kufanya uchunguzi wa asidi ya nucleic na sampuli za anticoagulant baadaye, inashauriwa kutumia chombo cha damu cha utupu kilicho na EDTA anticoagulant kukusanya damu;kwa sampuli za seramu, inashauriwa kutumia chombo cha damu cha utupu bila anticoagulant.

2. Sampuli usufi

Inashauriwa kutumia swabs za polypropen badala ya swabs za alginate ya kalsiamu au swabs na miti ya mbao, kwa sababu zinaweza kuwa na vitu vinavyozuia virusi fulani na kuzuia upimaji wa PCR.Swabs zilizo na vichwa vya pamba haziwezi kutumika, kwa sababu nyuzi za pamba zina adsorption kali ya protini na hazipatikani kwa urahisi katika suluhisho la uhifadhi linalofuata.

Katika "Vipimo vya Kiufundi vya Ukusanyaji na Ugunduzi wa Asidi Mpya za Virusi vya Korona", imebainishwa wazi kwamba "sufi ya sampuli inapaswa kufanywa kwa polyester, nailoni na nyenzo zingine zisizo za pamba na zisizo za kalsiamu, na mpini unapaswa kutengenezwa kwa nyenzo zisizo za mbao.Sehemu ya kuvunjika ni takriban 3cm kutoka juu ya kichwa cha usufi, ambayo ni rahisi kukatika.

CDC nchini Marekani pia ilitaja “Tumia swabs za nyuzi za sintetiki pekee zilizo na viunzi vya plastiki au waya.Usitumie swabs za alginate ya kalsiamu au swabs zilizo na miti ya mbao;kwani zinaweza kuwa na vitu vinavyozima baadhi ya virusi na kuzuia upimaji wa PCR.

Hivi sasa inayotumika sana ni usufi wa nailoni unaoweza kutupwa pamoja na fimbo ya plastiki.Usufi unaofurika una ufyonzaji bora wa maji na kiwango cha kutolewa.Kwa mujibu wa maeneo tofauti ya sampuli, kichwa cha swab pia kina ukubwa tofauti na nyuzi.unene.”

3. Suluhisho la kuhifadhi usafiri wa sampuli

Suluhisho la uhifadhi la kutofanya kazi kwa virusi: kiasi kinachofaa cha mkusanyiko wa chumvi ya guanidine na aina mbalimbali za vipengele vya uchanganuzi wa virusi vinaweza kusambaza virusi moja kwa moja ili kutoa asidi ya nukleiki, kuzima RNase na DNase, na kuhakikisha uadilifu wa asidi nucleic, ambayo inaweza kutumika kwa ajili ya kugundua qPCR baadae.Haiwezi kutumika kwa kilimo cha virusi na kutengwa.

Usafiri wa virusi na ufumbuzi wa kuhifadhi: ina chumvi, amino asidi, vitamini, glucose na protini zinazohitajika kwa maisha ya virusi, ambayo inaweza kudumisha shughuli za virusi.Inaweza kutumika kwa ajili ya uchimbaji wa asidi nucleic na kugundua virusi katika siku zijazo, na pia inaweza kutumika kwa ajili ya kilimo na kutenganisha virusi.

4. Sampuli ya kuhifadhi tube na mfuko sampuli

Sampuli ya mirija ya kuhifadhi inapaswa kuwa mirija tasa ya plastiki yenye kofia ya skrubu ambayo haitumii asidi nucleic.Kila bomba la sampuli linapaswa kufunikwa na mfuko wa sampuli ili kuzuia kuvuja na uchafuzi wa sampuli.

III.Dutu zinazoingilia katika sampuli

Dutu zinazoingilia katika majaribio ya PCR

1. kuingiliwa endogenous

Dutu zilizopo kwenye sampuli ya mwili zinaweza kutatiza ugunduzi wa vitu vingine.

Damu:heme (> 1mg/ml), hemini (> 0.1ng/μl), triglycerides, IgG, nk;

Mkojo:Urea (20mM);

Kinyesi:kupanda polysaccharides, cholate;

Tishu:protini, collagen;

Maziwa: protease, ioni ya kalsiamu;

Madawa: antibiotics, dawa za kuzuia virusi, homoni, nk.

nyingine.

2. mwingiliano wa nje

Inatoka kwa vitu vinavyoweza kuingilia kati na kugundua vitu vingine katika vitro.Viungio vya sampuli na vitu vinavyoweza kupatikana wakati wa kukusanya na kusindika sampuli:

Vifaa vya mtihani: jeli ya kutenganisha seramu, chombo cha kukusanya sampuli na kizuia mpira, katheta, kiowevu cha kusafisha katheta, poda ya glavu, n.k.

Anticoagulant: heparini (>0.1 U/mL), EDTA (>0.5 mM), nk.;

Vimumunyisho vya kikaboni: isopropanol (> 0.1 IU/ml), betaine, dimethyl sulfoxide, formamide, glycerin, PEG, nk;

Dawa za kuua viini: alkoholi (ethanol>1%), aldehidi, phenoli (phenol>0.2%), peroksidi, asidi kali (HCL), alkali kali (NaOH), nk.;

Sabuni:SDS (>0.005%);

Udongo: Humu

Rangi: Indigo

nyingine.

Chini ya hali halisi za sampuli za nje, kama vile kukusanya sampuli za mazingira, sampuli zinaweza kuwa na aina mbalimbali za dutu zinazoingilia, na muundo wa dutu zinazoingilia katika kila eneo ni tofauti, ambayo inahitaji majaribio ya kuingiliwa kwa PCR kutekelezwa kulingana na hali za ndani.

IV.Mfano wa hali ya uhifadhi na usafirishaji

Vielelezo vya kliniki vilivyokusanywa hivi karibuni vinapaswa kutumwa kwenye maabara ndani ya saa 2 hadi 4 baada ya kukusanywa kwa 2°C hadi 8°C.Hifadhi kwa 4℃ ndani ya 24h.Sampuli zinazotumiwa kwa kutengwa kwa virusi na kugundua asidi ya nucleic zinapaswa kupimwa haraka iwezekanavyo.Sampuli ambazo zinaweza kujaribiwa ndani ya masaa 24 zinaweza kuhifadhiwa kwa 4 ° C;vielelezo ambavyo haviwezi kugunduliwa ndani ya saa 24 vinapaswa kuhifadhiwa kwa -70 ° C au chini (ikiwa sivyo- Hifadhi kwa 70 ° C kwenye jokofu saa -20 ° C).

Muhtasari:Mkusanyiko sanifu, usafirishaji na uhifadhi wa sampuli ni muhimu kwa majaribio yanayofuata.Vipimo vya uongo vya vipimo vingi vya maabara husababishwa na ukusanyaji usiofaa, usafiri na uhifadhi wa sampuli ambazo husababisha uharibifu wa asidi ya nucleic ya virusi.Hata hivyo, maabara nyingi bado zinapuuza umuhimu wa sampuli.Natumai nakala hii inaweza kuamsha umakini wa kila mtu kwa sampuli na kufanya sampuli zaidi za kisayansi na zinazofaa!

Bidhaa inayohusiana:

Kifaa cha Kugundua Asidi ya Nyuklia ya SARS-CoV-2 (I) (Njia ya Uchunguzi wa Umeme wa Multiplex PCR)-Kwa Kugundua Waliobadilika Kutoka Brazil, Afrika Kusini, na Uingereza.