Kuhusu uchimbaji wa RNA

Miaka thelathini iliyopita, kwa uchimbaji wa RNA, tulichoweza kufikiria ilikuwa tu jinsi ya kupata RNA kamili, hata hivyo, hakukuwa na hitaji la kasi ya uchimbaji (Tekolojia ya kizazi cha kwanza njia ya Trizol iliyozaliwa).Kwa usasishaji unaorudiwa wa teknolojia ya uchimbaji wa RNA, tunachoweza kufanya sio tu kupata matokeo.Wakati wanakabiliwa na uchimbaji wa vitendanishi vya msingi vya Trizol vya kizazi cha kwanza, wajaribu kwa ujumla walikuwa na wasiwasi na hatua zake za uendeshaji mbaya;ingawa baada ya uboreshaji na uvumbuzi mwingi, bado ilichukua muda mwingi.Wakati huo huo, vitendanishi vya kikaboni kama vile phenoli na klorofomu vinahitaji kutumiwa katika mchakato wa uchimbaji, ambayo pia inatishia usalama wa wafanyikazi husika kwa kiwango fulani.

Ufanisi, rahisi na salama

Kupata bidhaa bora, rahisi na salama ya uchimbaji wa RNA imekuwa lengo kuu la wajaribu.Kwa hivyo, Mbinu ya utangazaji ya Safu ya Silica Spin kwa uchimbaji wa RNA ilitokea.Bidhaa za uchimbaji wa RNA za kizazi cha tatu za Foregene zinatokana na faida za bidhaa za uchimbaji wa safu ya kizazi kilichopita, kwa kutumia(DNA-Cleaning + RNA pekee) teknolojia mbili za Spin Column ili kuondoa gDNA na uchafu wa tishu kwa wakati mmoja, bila matibabu ya DNase ya gDNA iliyobaki, na kutotumia tena fenoli, n.k. Vitendanishi vyenye sumu na madhara, hatari ya chini na ya muda mfupi ya mavuno ya RNA ili kufikia mavuno mengi.

Chati ya kulinganisha ya mchakato wa uendeshaji

Chati ya kulinganisha matokeo ya majaribio

Seti ya kutenganisha jumla ya RNA ya Foregene ina mavuno mengi ya uchimbaji wa RNA, usafi mzuri, na athari ya uchimbaji wa miRNA ni bora kuliko vifaa vingine vya chapa.

Electrophoresis ya 50 mg ya jumla ya RNA ya ini ya panya iliyotolewa kwa njia tofauti
Kizazi cha kwanza (1: Trizol)
Kizazi cha pili (2: Seti ya uchimbaji wa RNA kutoka kwa kampuni A)
Kizazi cha tatu (3: Seti ya uchimbaji wa RNA pamoja na kutoka kwa kampuni A, 4: Foregene:RNA seti za Kutenganisha)

grafu ya qPCR (grafu ya curve ya ukuzaji)

DNA ya genomic lazima iondolewe kwa ufanisi wakati wa uchimbaji wa RNA, vinginevyo itakuwa na athari zisizoweza kudhibitiwa kwenye majaribio ya chini ya mkondo (thamani ya mapema ya CT, chanya za uwongo).Seti ya kizazi kijacho ya Foregene inaweza kuondoa kikamilifu DNA ya jeni bila kuongezwa kwa DNase, kuokoa muda mwingi, huku ikiepuka uharibifu unaosababishwa na uchafuzi wa nje wa RNase.
Kizazi cha kwanza (kijani kinaonyesha TRlzol-, nyekundu inaonyesha TRlzol+)

Kizazi cha pili (Bluu inaonyesha seti ya uchimbaji ya Kampuni ya RNA -, nyekundu inaonyesha Kampuni A RNA kit +)

Kizazi cha tatu (bluu inaonyesha vifaa vya uchimbaji vya RNA pamoja na, kijani kinaonyesha vifaa vya kutengwa vya Foregene RNA)

(Kumbuka: “_” kwenye grafu ya qPCR inaonyesha kuwa DNase haijaongezwa, na uchafuzi wa DNA haujaondolewa; “+” inaonyesha kuwa DNase imeongezwa, na uchafuzi wa DNA umeondolewa)

Kamilisha uchimbaji wa RNA ndani ya dakika 11

Hakuna haja ya miaka mingi ya mkusanyiko wa uzoefu wa uchimbaji wa asidi ya nukleiki, bidhaa za mfululizo wa vifaa vya kutengwa vya RNA vya ufanisi wa juu vya Foregene zinaweza kukuwezesha kupata RNA yenye mavuno ya juu na usafi wa hali ya juu ndani ya dakika 11 ili kukidhi mahitaji mbalimbali ya majaribio ya mkondo wa chini.

Kufikia sasa, bidhaa za mfululizo wa vifaa vya Foregene jumla vya RNA isolaton zimetambuliwa na idadi kubwa ya wateja na zimechangia fasihi nyingi za alama za juu.Matumizi halisi ya mteja ya chati ya maoni ya elektrophoresis na mkunjo wa kiasi wa ukuzaji wa PCR baada ya unukuzi wa kinyume unaonyesha kuwa RNA inayotolewa kwa kutumia bidhaa za Foregene sio tu ya mkusanyiko wa juu, lakini pia katika uadilifu mzuri.Ni teknolojia ya bidhaa tu ambayo imejaribiwa na soko inaweza kupendelewa na kila mtu.

Seli Jumla ya Seli ya Kutenga ya RNA

Mavuno ya juu ya RNA

Haraka: Maliza Kutengwa kwa RNA kwa dakika 11

Usalama: Hakuna Kemikali ya kikaboni iliyoongezwa

Baadhi ya manukuu ya alama za juu:

1. Yuan Fang, Zezhong Liu, Yang Qiu, et al.Uzuiaji wa ukandamizaji wa virusi wa protini za RNAi na peptidi za wabunifu hulinda kutokana na maambukizi ya enteroviral katika vivo, Kinga, 54 (10), 2021: 2231-2244.e6.(KAMA:31.745,Seti ya Kutengwa ya RNA ya Virusi，Paka No.RE-02011)

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1074761321003617

2. Ren, Y., Wang, A., Wu, D. et al.Uzuiaji wa mara mbili wa kinga ya asili na apoptosis na protini ya cytomegalovirus ya binadamu UL37x1 huwezesha ufanisi wa uzazi wa virusi.Nat Microbiol 7, 1041–1053 (2022).(KAMA:30.964,Seli Jumla ya Seli ya Kutenga ya RNA，Paka No.RE-03111)

https://doi.org/10.1038/s41564-022-01136-6