PCR machine|Unaelewa kweli?

Teknolojia ya PCR iliyoshinda Tuzo ya Nobel

Mnamo 1993, mwanasayansi wa Amerika Mulis alipokea Tuzo ya Nobel ya Kemia, na mafanikio yake yalikuwa uvumbuzi wa teknolojia ya PCR.Uchawi wa teknolojia ya PCR uko katika sifa zifuatazo: Kwanza, kiasi cha DNA cha kukuzwa ni kidogo sana, na kinadharia molekuli moja inaweza kutumika kwa ukuzaji;pili, ufanisi wa ukuzaji ni wa juu, na kiasi cha jeni inayolengwa ni kubwa.Kukuza, zaidi ya mara milioni 10 kwa saa chache.Sasa chombo cha PCR kimetumika sana katika utafiti wa sayansi ya maisha na vipengele vingine vingi.

Aina tofauti na watengenezaji wa baiskeli za joto wanaweza kuonyesha utendaji tofauti na kurudiwa.Tofauti hizi huathiri sio tu ufanisi wa PCR lakini pia usahihi na uthabiti wa data iliyopatikana.Kuelewa vipengele vya mashine ya PCR kunaweza kutusaidia kuongeza ufanisi wa majaribio yetu.

Moduli ya kupokanzwa

Usahihi wa hali ya joto ya mzunguko wa joto inaweza kuwa muhimu kwa mafanikio au kushindwa kwa PCR.Uthabiti wa halijoto ya kisima hadi kisima kwenye kizuizi cha kupokanzwa pia ni muhimu ili kupata matokeo ya kuaminika na yanayoweza kuzaliana ya PCR.

Njia moja ya kuhakikisha usahihi wa halijoto ni kufanya majaribio mara kwa mara kwa kutumia vifaa vya kuthibitisha halijoto na kusawazisha upya inavyohitajika na mtaalamu aliyefunzwa.Vipimo vya uthibitishaji wa halijoto kwa kawaida hutumiwa:

Usahihi wa kisima-kisima kuhusiana na kuweka joto katika hali ya isothermal

Usahihi wa kisima-kisima kuhusiana na halijoto iliyowekwa baada ya ubadilishaji wa halijoto

Usahihi wa Joto la Mfuniko wa Joto

Udhibiti wa Joto wa Kuongeza joto

Udhibiti wa halijoto ya gradient ni utendakazi wa kifaa cha PCR ambacho hurahisisha uboreshaji wa uwekaji wa kichungi kwenye PCR.Madhumuni ya mpangilio wa upinde rangi ni kufikia viwango tofauti vya joto kati ya moduli, na kwa ≥2°C kupanda na kushuka kati ya kila safu, halijoto tofauti zinaweza kujaribiwa kwa wakati mmoja ili kupata halijoto bora zaidi ya kupenyeza kitangulizi.Kinadharia, gradient ya kweli hufikia joto la mstari kati ya moduli.

Walakini, baisikeli za kawaida za gradient kwa kawaida hutumia kizuizi kimoja cha joto na kudhibiti halijoto kupitia vipengele viwili vya kupoeza na kupoeza vilivyo katika ncha zote mbili, mara nyingi husababisha vikwazo vifuatavyo:

Viwango viwili pekee vya joto vinaweza kuwekwa: halijoto ya juu na ya chini kwa ajili ya uchujaji wa kwanza huwekwa kwenye ncha zote mbili za moduli ya joto, na mpangilio sahihi wa halijoto zingine hauwezi kupatikana kati ya moduli.

Kutokana na ubadilishanaji wa joto kati ya safu wima tofauti, halijoto kati ya maeneo tofauti kwenye moduli ina uwezekano mkubwa wa kufuata mkunjo wa sigmoidal badala ya kipenyo cha kweli cha mstari.

Sampuli ya joto

Uwezo wa kiendesha mzunguko wa joto kudhibiti joto la sampuli ni muhimu sana kwa usahihi wa matokeo ya PCR.Vigezo mahususi vya ala kama vile viwango vya njia panda, saa za kushikilia, na kanuni za kanuni ni muhimu kwa kutabiri halijoto ya sampuli.

Kiwango cha kupokanzwa na kupoeza kwa mashine ya PCR inamaanisha kuwa hali ya joto hubadilika kati ya hatua za PCR zinazotokea kwa muda fulani.Kwa kuwa inachukua muda fulani kwa joto kuhamisha kutoka kwa moduli hadi kwa sampuli, kiwango halisi cha kupokanzwa na kupoeza kwa sampuli kitakuwa polepole.Kwa hiyo, ufafanuzi wa kasi ya mabadiliko ya joto unahitaji kutofautishwa na kueleweka.

Kiwango cha juu zaidi au kilele cha kiwango cha njia panda ya moduli inawakilisha mabadiliko ya kasi ya joto ambayo moduli inaweza kufikia kwa muda mfupi sana wakati wa ngazi.

Kiwango cha wastani cha njia panda ya kuzuia huwakilisha kasi ya mabadiliko ya halijoto kwa muda mrefu na itatoa kipimo kiwakilishi zaidi cha kasi ya mashine ya PCR.

Sampuli ya juu zaidi ya kiwango cha kupokanzwa na kupoeza na sampuli ya wastani ya kiwango cha kupokanzwa na kupoeza huonyesha halijoto halisi iliyopatikana na sampuli.Kasi ya sampuli ya kupokanzwa na kupoeza itatoa ulinganisho sahihi zaidi wa utendakazi wa mashine ya PCR na athari yake inayowezekana kwenye matokeo ya PCR.

Wakati wa kufanya uingizwaji wa baisikeli, inashauriwa kutumia kifaa kilicho na programu ya kiwango cha njia panda inayoiga hali ya awali kwa uingizwaji rahisi na athari ndogo kwa kurudiwa kwa PCR.

Kizunguko cha joto kinapaswa kuundwa kwa hatua za muda tu baada ya sampuli kufikia joto lililowekwa.Kwa njia hii, wakati ambao sampuli huhifadhiwa kwenye joto la kuweka itahifadhiwa kwa usahihi zaidi na hali ya mzunguko unaofanana unaohitajika katika utaratibu wa uendeshaji.

Viendesha baisikeli za joto mara nyingi hutumia algoriti changamano za hisabati ili kuhakikisha kuwa sampuli zinaweza kufikia haraka joto lililowekwa kulingana na mpango uliowekwa mapema.Kulingana na kiasi cha mfumo wa majibu na unene wa plastiki ya PCR iliyotumiwa, algoriti inaweza kutabiri halijoto ya sampuli na muda itachukua ili kufikia halijoto iliyowekwa.Kwa kutegemea algoriti hizi, wakati wa kupokanzwa au kupoeza kwa kizunguzungu cha joto, joto la kuzuia kwa kawaida litazidi thamani iliyowekwa kupitia mchakato unaoitwa overshoot ya kuzuia joto au undershoot.Mpangilio kama huo huhakikisha kuwa sampuli hufikia halijoto iliyowekwa haraka iwezekanavyo bila kuzidisha risasi au kujishusha yenyewe.

Utekelezaji wa majaribio

Mambo yanayoweza kuongeza upitishaji wa kiendesha mzunguko wa joto ni pamoja na viwango vya njia panda, usanidi wa vizuizi vya mafuta, na ujumuishaji wa majukwaa ya kiotomatiki.

Kiwango cha joto na baridi cha mzunguko wa joto huwakilisha kasi ambayo hufikia joto lililowekwa.Kwa kasi ya kupanda na kushuka kwa joto, PCR itaendesha kwa kasi, ambayo ina maana kwamba majaribio zaidi yanaweza kukamilika kwa muda fulani.Kwa kuongeza, majaribio yanaweza kuharakishwa kwa kutumia polima za DNA za kasi zaidi.

Muundo wa moduli ya mzunguko wa joto pia ni muhimu kwa majaribio ya PCR.Kwa mfano, moduli zinazoweza kubadilishwa huruhusu kubadilika kwa idadi ya sampuli kwa kila kukimbia.Kwa kuongeza, moduli za kupokanzwa zilizo na moduli zinazoweza kudhibitiwa ni bora kwa kuendesha programu tofauti za PCR wakati huo huo kwenye mzunguko mmoja wa joto.

Kwa PCR ya upitishaji wa hali ya juu ya kiotomatiki, programu inayodhibiti mfumo wa kushughulikia bomba inapaswa kupangwa na kuoana.Mifumo otomatiki ni bora kwa kutekeleza athari za PCR za kiwango cha juu kwa sababu inaweza kuendeshwa kila mara kwa kutoingilia kati kwa mwanadamu, na hivyo kupunguza muda unaohitajika kwa usanidi wa majaribio mwenyewe na kuongeza idadi ya maitikio katika kipindi fulani cha muda .

Kuegemea, Uimara na Uhakikisho wa Ubora wa Baiskeli za Joto

Mbali na utendakazi na uwezo wa kusambaza, mashine ya PCR inapaswa pia kuwa na uwezo wa kustahimili matumizi fulani ya mara kwa mara, mkazo wa mazingira, na hali ya usafirishaji.Watengenezaji wengine wanaweza kuripoti jinsi chombo hufanya majaribio ya kutegemewa na uimara.Ugunduzi unaolingana wa kifaa cha PCR ni pamoja na:

Kuegemea: Mitambo ya mitambo hutumika kufanya majaribio yanayorudiwa kwenye vipengee vya chombo vinavyotumiwa mara kwa mara kama vile vifuniko vya joto, paneli za kudhibiti/skrini za kugusa na moduli za uendeshaji wa baiskeli.

Shinikizo la mazingira: Vyumba vya mazingira vinaweza kutumika kuiga hali tofauti za majaribio ya kawaida, kama vile halijoto, unyevunyevu.

Jaribio la Usafirishaji: Upimaji mkali wa mshtuko na mtetemo unaweza kufanywa kulingana na viwango vya Jumuiya ya Kimataifa ya Usalama ya Usafirishaji ili kuhakikisha chombo kinaweza kufika katika hali ya uendeshaji ambayo haijaharibiwa.

Udhamini na huduma ya kudumisha mashine ya PCR

Licha ya kuegemea na majaribio ya kudumu, waendesha baisikeli za joto bila shaka wana matatizo ya kiufundi katika maisha ya chombo.Kwa amani ya akili, dhamana ya mtengenezaji, huduma, na matengenezo inapaswa kuzingatiwa wakati wa kununua chombo.

Unyumbufu wa huduma kama vile matengenezo ya tovuti/kurudi-kwa-kiwanda, huduma za ufuatiliaji wa mbali, na zana mbadala katika mchakato wa matengenezo, n.k., ili kupunguza athari kwenye ufanisi wa kazi.

Urefu wa kipindi cha udhamini, muda wa kubadilisha huduma, upatikanaji wa usaidizi wa kiufundi, na ujuzi wa wafanyakazi wa usaidizi wa kitaaluma.

Uwezekano wa usakinishaji wa chombo, uendeshaji, ushirikiano, na uthibitishaji ili kukidhi mahitaji ya maabara na yanayohusiana na udhibiti.Huduma za urekebishaji kama vile uthibitishaji wa halijoto, upimaji na urekebishaji zinapatikana ili kuhakikisha kuwa chombo kinafanya kazi ipasavyo na vigezo vinavyolingana.

Bidhaa Zinazohusiana: