Kimeng'enya cha Taq kinachoanza moto hutumika sana.Ikilinganishwa na polimerasi ya DNA ya kawaida, kimeng'enya cha Taq cha kuanza-moto kinaweza kuepuka upanuzi usio maalum na uundaji wa vipimo vya utangulizi, na inaweza kuboresha kwa ufanisi kiwango cha mafanikio cha upanuzi wa jeni lengwa.Hasa katika uwanja wa upimaji wa kijeni, kimeng'enya cha Taq cha kuanza moto kimetambuliwa kama kiwango cha lazima katika tasnia, na polima ya DNA ya kawaida haipaswi kutumiwa.Kama inavyoonekana kutoka hapo juu, vimeng'enya vya Taq vya kuanza moto vinatumika sana.Kwa sasa, kuna chapa nyingi za vimeng'enya vya Taq zinazoanza moto kwenye soko la ndani, lakini hakuna vimeng'enya vingi vya Taq vyenye ubora wa juu.Tunakabiliwa na bidhaa nyingi za kimeng'enya za Taq za kuanza moto, tunapaswa kuchagua vipi?

1. Chagua kimeng'enya cha kuanza-moto cha Taq chenye ufanisi wa juu wa ukuzaji

Ufanisi wa ukuzaji wa PCR unahusiana kwa karibu na utendaji wa kimeng'enya cha Taq.Baada ya mfumo mzuri wa mmenyuko wa kimeng'enya cha Taq kuboreshwa, ufanisi wa ukuzaji ni zaidi ya 95%, na anuwai ya ukuzaji wa kiasi cha kiolezo cha mwanzo ni pana.Ukuzaji wa kuridhisha unaweza kupatikana wakati maudhui ya jeni lengwa ni ya chini, na si rahisi kuwa na sumu wakati kiasi cha kiolezo ni kikubwa, na muda wa ukuzaji wa kielelezo ni mrefu.Kwa kimeng'enya cha Taq chenye utendakazi duni, hata kama mfumo wa majibu umeboreshwa kwa mara nyingi, ufanisi wa ukuzaji bado ni chini ya 90%, umbo la "S" la curve ya ukuzaji si dhahiri, mteremko ni mdogo, na curve ni tambarare.Wakati kiasi cha template ni cha chini, haiwezi kuimarishwa, na wakati kiasi cha template ni cha juu, athari ya amplification haifai.Kwa hivyo, uteuzi wa polima za DNA zenye ufanisi wa juu wa ukuzaji ni muhimu kwa mafanikio ya PCR na qPCR.

2. Chagua kimeng'enya cha Taq cha kuanza moto chenye nguvu ya kimeng'enya

Nguvu ya enzymatic ya enzyme ya Taq inahusiana na ufanisi wa ukuzaji.Kwa ujumla, kadiri nguvu ya kimeng'enya ya Taq inayoanza moto inavyoimarika, ndivyo muda wa ukuaji wa kielelezo wa PCR unavyoongezeka, mduara wa kawaida wa 'S-umbo', ndivyo thamani ya mawimbi ya umeme inavyopanda, na ndivyo inavyofaa zaidi kwa utambuzi wa PCR nyingi.Polima za DNA za chapa zilizo na nguvu dhaifu ya enzymatic kwa ujumla zinaweza kuauni miitikio ya plex 2 pekee.Wakati wa kufanya athari 3-plex, curve ya amplification ni ya chini, thamani ya ishara ya fluorescence ni ya chini, na hakuna curve ya kawaida ya amplification, hivyo matokeo ni vigumu kuhukumu.

3. Chagua kimeng'enya cha Taq cha kuanza moto chenye usikivu wa juu

Kwa ujumla, polymerase ya DNA ina ufanisi wa juu wa ukuzaji na unyeti wa juu, lakini pia kuna kutokwenda.Ikiwa wingi wa jeni lengwa la sampuli itakayokuzwa ni mdogo, inashauriwa kupima unyeti wa ukuzaji wa kimeng'enya cha Taq.Mbinu ya kawaida ya kugundua ni kutengenezea upinde rangi mara 10 au mara 5 ya kipande lengwa cha plasmid ya jeni, kufanya utambuzi wa PCR kwenye dilution ya chini, na kuchagua kimeng'enya cha Taq cha kuanza moto chenye usikivu wa juu zaidi wa utambuzi.

Inaweza kuonekana kutoka kwa hapo juu kwamba watafiti wanahitaji kuchagua kulingana na mahitaji yao ya majaribio na hali ya ufadhili.Ni bora kufanya jaribio la ukuzaji wa kinyunyuzio cha gradient ili kugundua ufanisi wa ukuzaji na unyeti wa kimeng'enya cha Taq cha kuanza moto.

Mfano wa Foregene'Taq DNA Polymerase:

Njia rahisi ya HS Taq DNA Polymerase

Maelezo

Foreasy HS Taq DNA Polymerase ni polimerasi ya DNA inayoonyeshwa katika bakteria ya uhandisi ya Escherichia coli kwa teknolojia ya ujumuishaji wa jeni.Kimeng'enya kimeunganishwa na kizuia athari ya kipekee, ambayo hufanya bidhaa kustahimili na kufaa kwa kiwango kikubwa, na inaweza kutumia moja kwa moja sampuli ya lisati (mfumo wa Forgene Lysis) kama kiolezo cha miitikio ya utambuzi.

Maombi

PCR ya ubora na utambuzi wa kiasi wa PCR wa violezo vilivyosafishwa na violezo visivyosafishwa.

Udhibiti wa Ubora

1.Hakuna shughuli ya viini vya nje iliyogunduliwa

Mbinu ya 2.PCR ya kugundua mabaki ya DNA ya jeni bila mwenyeji

3.Inaweza kukuza kwa ufanisi jeni zenye nakala moja katika Jeni la mwanadamu

4.Hifadhi kwenye halijoto ya kawaida kwa wiki, shughuli zisizo dhahiri hubadilika

Maelezo ya bidhaa: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/