Anzisha jaribio la PCR SOP ili kusawazisha tabia ya wafanyakazi wa majaribio.
Jaribio hutii kikamilifu taratibu za uendeshaji, na hupunguza uchafuzi wa PCR ambao unaweza kusababishwa na sababu za kibinadamu au kuzuia kutokea kwa uchafuzi wa mazingira.Kwa kuongezea, mjaribio anapaswa kuwa na ujuzi na ujuzi wa kitaalamu unaolingana, ikiwa ni pamoja na ustadi wa vifaa vinavyohusiana na uendeshaji, kufafanua mchakato mzima wa kazi, ujuzi wa mbinu za matibabu ya uchafuzi na udhibiti wa ubora wa maabara, na kuwa na uwezo wa kutafsiri kwa usahihi matokeo ya mtihani.
Anzisha maabara ya kawaida ya PCR.
Maabara ya PCR imegawanywa katika maeneo manne kimsingi, ambayo ni eneo la maandalizi ya vitendanishi, eneo la usindikaji wa sampuli, eneo la ukuzaji na eneo la uchanganuzi wa bidhaa.Maeneo mawili ya kwanza ni maeneo ya upanuzi wa awali, na maeneo mawili ya mwisho ni maeneo ya baada ya amplification.Eneo la ukuzaji wa awali na eneo la baada ya ukuzaji linapaswa kutengwa kabisa.Nyenzo za majaribio, vitendanishi, karatasi ya kurekodia, kalamu, vifaa vya kusafisha, n.k., vinaweza tu kutiririka kutoka eneo la upanuzi wa awali hadi eneo la baada ya ukuzaji, yaani, kutoka eneo la maandalizi ya vitendanishi → eneo la usindikaji wa sampuli → eneo la ukuzaji → eneo la uchanganuzi wa bidhaa, na lazima lisitiririke nyuma .Mtiririko wa hewa katika maabara unapaswa pia kutiririka kutoka eneo la ukuzaji hadi eneo la baada ya ukuzaji, na sio kurudi nyuma.Muundo bora wa maabara ya PCR umeonyeshwa hapa chini:
Kielelezo A: Hali bora ya usanidi wa maabara ya PCR yenye shinikizo hasi kwenye chumba cha bafa
Kielelezo B: Hali bora ya usanidi wa maabara ya PCR yenye shinikizo chanya kwenye chumba cha bafa
Michoro ya usanidi wa maabara ya PCR iliyotolewa katika Kielelezo A na Kielelezo B inapaswa kuwa hali bora zaidi ya usanidi, na maabara yenye masharti yanaweza kurejelea modi hii kwa muundo.Kwa maabara ya kawaida, inashauriwa kuwa eneo la ukuzaji wa PCR na eneo la uchambuzi wa bidhaa linaweza kutenganishwa, na ufunguzi wa kifuniko unapaswa kupunguzwa iwezekanavyo katika eneo la maandalizi ya sampuli na eneo la ukuzaji wa PCR.Kumbuka: Bidhaa na vifaa vya majaribio katika eneo la uchanganuzi wa bidhaa vimepigwa marufuku kabisa kupelekwa kwenye eneo la utayarishaji wa sampuli na eneo la ukuzaji wa PCR.
Ikiwa maabara hufanya utambuzi na utambuzi wa PCR pekee, inashauriwa kutumia PCR ya upimaji wa fluorescent badala ya PCR ya kawaida.
Matokeo ya utambuzi wa kiasi cha Fluorescence PCR yanaweza kukusanywa na kuchambuliwa kwa ishara za umeme, kwa hivyo hakuna haja ya kufungua kifuniko cha electrophoresis baada ya majibu, ambayo huepuka uchafuzi wa bidhaa za PCR unaosababishwa na uvujaji wa bidhaa za majibu ili kuunda erosoli.Ikiwa unaongeza idadi ya fursa za kofia wakati wa hatua ya upakiaji wa electrophoresis ya gel, uchafuzi wa aerosol unaweza kutokea.Inashauriwa kukuza matumizi ya PCR ya kiasi na hatua kwa hatua kuchukua nafasi ya PCR ya ubora.
Mfumo wa uchafuzi wa bidhaa wa UNG dhidi ya PCR hutumiwa kwa majibu ya PCR.
Mfumo hutumia dUTP badala ya dTTP.Baada ya majibu ya PCR, bidhaa zote za PCR (vipande vya DNA) vinajumuishwa na dUTP;katika mzunguko unaofuata wa mmenyuko wa PCR, kimeng'enya cha UNG kilichoongezwa kwenye mfumo hudumishwa kwa 37°C kwa dakika 5 kabla ya PCR, ambacho kinaweza kuharibu vipande vyote vya DNA vilivyo na dUTP, na kisha kufanya athari ya PCR.Hii inaweza kuondoa kabisa uchafuzi wa erosoli unaosababishwa na bidhaa za PCR.Athari imeonyeshwa kwenye takwimu hapa chini:
Kumbuka: Kwa mfululizo wa PCR wa moja kwa moja, unaweza kuchagua bidhaa za mfululizo wa mfumo wa uchafuzi wa bidhaa wa Foregene.Pendekeza
Kwa maabara zinazofanya uchunguzi wa kiwango kikubwa cha uandishi wa jeni, inashauriwa sana kutumia mfumo wa uchafuzi wa bidhaa wa UNG dhidi ya PCR kwa ajili ya kupima vitendanishi pamoja na ujenzi wa maabara zinazofaa.
Kikumbusho: Matumizi ya mfumo huu hayawezi kuondoa uchafuzi wa bidhaa ya PCR ambao tayari umesababishwa.Kwa hivyo, mfumo wa UNG unapaswa kutumika mwanzoni mwa jaribio husika, na mfumo wa UNG utumike kwa ukuzaji wa PCR, ili kuzuia uchafuzi wa bidhaa za PCR Uongo chanya.
Inapendekezwa kutumia mfumo wa Direct PCR-UNG wa Foregene wakati wa kufanya majaribio makubwa, kama vile:
Plant Leaf Direct PCR Kit-UNG;
Panda Seed Direct PCR Kit-UNG;
Kifaa cha Tishu cha Wanyama cha PCR Kit-UNG;
Panya Tail Direct PCR Kit-UNG;
Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG.
Msururu huu wa vifaa kutoka Foregenehaiwezi tu kufanya utambuzi wa PCR haraka na kwa kiwango kikubwa, lakini pia kwa ufanisi kuzuia na kudhibiti uchafuzi wa bidhaa za PCR.
Muda wa kutuma: Mar-19-2021
