Kipengele bora cha mmenyuko wa PCR ni uwezo wake mkubwa wa ukuzaji na unyeti wa juu sana.Ili kuboresha utendakazi wa PCR na ufanisi wa ugunduzi, tumejitolea kuboresha uwezo wa ukuzaji wa PCR na unyeti wa kutambua, lakini maumivu ya kichwa yamo katika mchakato wa majaribio.Chanya zisizo za kweli mara nyingi hutokea, na kiasi kidogo sana cha sampuli ya uchafuzi mtambuka au uchafuzi wa bidhaa ya PCR inaweza kusababisha matokeo chanya katika jaribio.
Aina tano za uchafuzi wa bidhaa za PCR
Kuna sababu nyingi za uchafuzi wa PCR, ambazo zinaweza kugawanywa katika vikundi vifuatavyo:
Uchafuzi wa sampuli husababishwa hasa na uchafuzi wa chombo kwa ajili ya kukusanya sampuli, au wakati sampuli inapowekwa, hutolewa nje ya chombo kutokana na kufungwa kwa uhuru, au sampuli inazingatiwa nje ya chombo, ambayo husababisha uchafuzi wa msalaba;Uchafuzi husababisha uchafuzi kati ya vielelezo;baadhi ya vielelezo vya microbial, hasa virusi, vinaweza kuenea kwa erosoli au kuunda erosoli, na kusababisha uchafuzi wa pande zote.
Sababu kuu ni kwamba wakati wa utayarishaji wa vitendanishi vya PCR, bunduki ya sampuli, chombo, maji ya distilled mara mbili na ufumbuzi mwingine huchafuliwa na template ya asidi ya nucleic ya PCR.
Katika maabara za baiolojia ya molekyuli na baadhi ya maabara zinazotumia plasmidi zilizoundwa kama vidhibiti chanya, tatizo la uchafuzi wa plasmid uliobuniwa pia ni la kawaida.Kwa sababu maudhui ya plasmid ya cloning katika ujazo wa kitengo ni ya juu kabisa, na zana zaidi na vitendanishi vinahitajika katika mchakato wa utakaso, na plasmid katika seli hai kuna uwezekano mkubwa wa kuambukizwa kutokana na ukuaji mkubwa na uwezo wa uzazi wa seli hai.
Uchafuzi wa bidhaa zilizoimarishwa ni tatizo la kawaida la uchafuzi katika athari za PCR.Kwa sababu idadi ya nakala ya bidhaa ya PCR ni kubwa (kwa ujumla nakala 1013/ml), ambayo ni ya juu zaidi kuliko kikomo cha nambari ya nakala ya utambuzi wa PCR, kiasi kidogo sana cha uchafuzi wa bidhaa ya PCR kinaweza kusababisha chanya za uwongo.
Uchafuzi wa erosoli ndiyo aina inayowezekana zaidi ya uchafuzi wa bidhaa za PCR, na pia ni rahisi zaidi kupuuzwa.Inaundwa na msuguano kati ya uso wa kioevu na hewa.Kwa ujumla, uchafuzi wa erosoli unaweza kutengenezwa wakati kifuniko kinafunguliwa, wakati sampuli inasisitizwa, au hata wakati bomba la majibu linatikiswa kwa nguvu.Kwa mujibu wa mahesabu, chembe ya erosoli inaweza kuwa na nakala 48,000, hivyo uchafuzi unaosababishwa na hilo ni tatizo ambalo linastahili tahadhari maalum.
Hasa, maabara za upimaji mara nyingi hutumia jozi sawa za vitangulizi kujaribu jeni fulani.Baada ya muda, kiasi kikubwa cha uchafuzi wa bidhaa za PCR kitatokea katika nafasi ya maabara.Mara tu uchafuzi huo unatokea, ni vigumu kuiondoa kwa muda mfupi.
Kwa aina tatu za kwanza za uchafuzi wa mazingira, tunaweza kutumia njia bora za kuepuka, lakini uchafuzi unaosababishwa na bidhaa za PCR ni vigumu kuzuia, hasa katika ujenzi wa maabara ya PCR yasiyo ya kawaida.Katika mchakato wa PCR, wakati ncha ya pipette inavuta na kupiga kioevu, na kifuniko cha tube cha PCR kinafunguliwa, aerosol itaundwa.Molekuli za DNA zinazobebwa na erosoli (erosoli moja inaweza kubeba makumi ya maelfu ya DNA) ni vigumu kuondoa kwa sababu huelea hewani.Mara tu awamu inayofuata ya majaribio ya PCR inapoanzishwa, matokeo chanya ya uwongo yatatokea bila shaka.
Kama inavyoonyeshwa kwenye takwimu hapa chini, udhibiti hasi pia ulikuza bendi inayolingana ya riba:
Sehemu ya kwanza ya suala hili la uchafuzi na uzuiaji wa PCR imeanzishwa hapa.Toleo linalofuata litakuletea sehemu ya pili "Kuzuia uchafuzi wa bidhaa za PCR", kwa hivyo endelea kukaa!
Muda wa kutuma: Jul-25-2017
