Je, bado unatumia Trizol kutoa RNA?
Gosh, usiruhusu nijali kuhusu afya yako!
Trizol anakaribia kuwekwa pembeni, usiniambie bado uko gizani?

Sehemu kuu ya kitendanishi cha Trizol ni phenoli, na vitendanishi vya kikaboni kama vile klorofomu pia huongezwa katika operesheni ya majaribio.Mfiduo wa muda mrefu utasababisha madhara kwa afya yako, haswa kugusa ngozi moja kwa moja kunaweza kusababisha kuchoma kwa kemikali kali na makovu ya kudumu.

Katika hali ya kawaida, washirika wa maabara wanaweza tu kupunguza hatari kwa kujizatiti kikamilifu (kuvaa makoti ya maabara, glavu na barakoa).

Na ushauri wangu kwako ni: tafadhali badilisha Trizol moja kwa moja ili kuepuka madhara kutoka kwa chanzo.

1. Bidhaa ya kizazi cha kwanza cha uchimbaji wa RNA
Ilitoka mnamo 1987 (vitendanishi vya Trizol)

faida:
Uchimbaji kamili zaidi

Hasara:
Vitendanishi vyenye sumu kama vile guanidine isothiocyanate-phenol-chloroform vinatakiwa;
Operesheni ngumu;
Inahitajika kutumia DNase kuondoa uchafuzi wa DNA

2.Bidhaa ya kizazi cha pili cha uchimbaji wa RNA
Toka mwaka wa 1994 (QIAGEN RNeasy na bidhaa nyingi za ndani)

faida:
Njia ya centrifugal ya safu inapitishwa, ambayo ni rahisi kufanya kazi;

Ubaya:
Haja ya centrifuge ili kuondoa uchafu wa tishu
Inahitajika kutumia DNase kuondoa uchafuzi wa DNA

3.Bidhaa ya kizazi cha tatu cha uchimbaji wa RNA
Ilitoka mnamo 2005 (QIAGEN RNeasy Plus na ForegeneBidhaa za mfululizo wa utakaso wa RNA)

faida:
Tumia safu ya kuondolewa kwa DNA moja kwa moja ili kuondoa DNA na uchafu wa tishu kwa wakati mmoja, kuokoa muda na jitihada;
Salama na rahisi, hakuna haja ya kuongeza safu ya kichungi na DNase ili kuondoa uchafu kwa urahisi na kuzuia uchafuzi wa DNA.

Wacha tuangalie tofauti za kiutendaji kati ya bidhaa ya kizazi cha kwanza (Trizol), bidhaa ya kizazi cha pili (RNeasy) na bidhaa ya kizazi cha tatu (Forgene) ya uchimbaji wa RNA:

Uendeshaji katika takwimu ni wazi: bidhaa ya kizazi cha tatu ina faida dhahiri

Maneno matatu tu ya kuelezea: rahisi!Haraka!Usalama

Chati ya PK ya matokeo ya majaribiokwabidhaa za kizazi cha kwanza, cha pili na cha tatu cha uchimbaji wa RNA:

1. Electrophoretogram

Kizazi cha kwanza (1: Trizol)
Kizazi cha pili (2:QIAGEN RNeasy)
Kizazi cha tatu (3: QIAGEN RNeasy plus, 4: Foregene)

Ni aina gani ya bidhaa ni nzuri, utajua kwa kulinganisha
RNA imetolewa kwa kutumia vifaa vya Foregene
Sio tu mkusanyiko wa juu lakini pia uadilifu mzuri

Grafu ya 2.qPCR (grafu ya curve ya ukuzaji)

Kizazi cha kwanza (Trizol)

Kizazi cha pili (bluu ya angamaana yakeQIAGEN RNeasy-, nyekundumaana yakeQIAGEN RNeasy +)

Kizazi cha tatu (bluu inamaanisha Foregene, kijani inamaanisha QIAGEN RNeasy plus)

(Kumbuka: Kizazi cha pili cha QIAGEN RNeasy cha grafu ya qPCR inamaanisha kuwa kit hakiongezi DNase na hakiondoi uchafuzi wa DNA. Kwa hiyo, CT ni ya juu zaidi na matokeo si sahihi; QIAGEN RNeasy + inamaanisha kuwa DNase imeongezwa na uchafuzi wa DNA umeondolewa, na matokeo yake ni sahihi)

Iwe ni electrophoretogram au grafu ya kiasi ya ukuzaji wa PCR, ubora wa bidhaa za Foregene sio duni kuliko bidhaa za kigeni zinazoagizwa.