Seti ya Kutengwa ya DNA na RNA ya Virusi vya DNA na Vifaa vya Maandalizi ya Usafishaji wa Uchimbaji wa RNA
Vipimo
Maandalizi 50, Maandalizi 200
Seti ya Kutenganisha ya Usafishaji wa Asidi ya Nyuklia ya RNA ya Virusi hutumia safu wima na fomula iliyotengenezwa na Foregene, ambayo inaweza kutoa RNA ya ubora wa juu na ya ubora wa juu kutoka kwa sampuli kama vile plasma, seramu, umajimaji wa mwili usio na seli na nguvu kuu ya seli.Seti hii inaongeza Linear Acrylamide, ambayo inaweza kunasa kwa urahisi kiasi kidogo cha RNA kutoka kwa sampuli.Safu wima ya RNA Pekee inaweza kuunganisha RNA kwa ufanisi.Seti inaweza kusindika idadi kubwa ya sampuli kwa wakati mmoja.
Seti nzima haina RNase, kwa hivyo RNA iliyosafishwa haitaharibika.Buffer viRW1 na Buffer viRW2 zinaweza kuhakikisha kuwa asidi ya kiini ya virusi iliyopatikana bila protini, nuklea au uchafu mwingine, ambayo inaweza kutumika moja kwa moja kwa majaribio ya baiolojia ya molekuli ya chini ya mkondo.
Vipengele vya kit
| Linear Acrylamide |
| Bafa DRL |
| Buffer RW1, Buffer RW2 |
| RNase-Free ddH2O |
| Safu ya DNA/RNA |
| Maagizo |
Vipengele&faida
■ Operesheni kwenye joto la kawaida (15-25℃) katika mchakato mzima, bila umwagaji wa barafu na uingizaji hewa wa joto la chini.
■ Seti kamili ya RNase-Free, hakuna haja ya kuwa na wasiwasi kuhusu uharibifu wa RNA.
■ Mavuno ya juu ya asidi nucleiki: Safu wima ya DNA/RNA pekee na fomula ya kipekee inaweza kusafisha DNA na RNA kwa ufanisi.
■ Uwezo mkubwa wa usindikaji wa sampuli: hadi sampuli 200μl zinaweza kuchakatwa kila wakati.
■ Kasi ya haraka: rahisi kufanya kazi na inaweza kukamilika ndani ya dakika 20.
■ Usalama: hakuna kitendanishi kikaboni kinachohitajika.
■ Ubora wa juu: Vipande vya RNA vilivyosafishwa ni vya usafi wa juu, visivyo na protini na uchafu mwingine, na vinaweza kukidhi matumizi mbalimbali ya majaribio ya chini ya mkondo.
Programu ya kit
Inafaa kwa ajili ya uchimbaji na utakaso wa asidi nucleic ya virusi katika sampuli kama vile plasma, seramu, maji ya mwili yasiyo na seli na nguvu ya juu ya seli.
Mtiririko wa kazi
Mchoro
Uhifadhi na maisha ya rafu
■ Seti hii inaweza kuhifadhiwa kwa muda wa miezi 24 chini ya hali kavu kwenye joto la kawaida (15-25℃);ikiwa inahitaji kuhifadhiwa kwa muda mrefu zaidi, inaweza kuhifadhiwa katika 2-8 ℃.
■ Suluhisho la Linear Acrylamide linaweza kuhifadhiwa kwa joto la kawaida kwa siku 7;baada ya kupokea kit, tafadhali kitoe na uhifadhi kwenye -20°C.
■ Baada ya kuongeza Linear Acrylamide kwenye Buffer DRL, inaweza kuhifadhiwa kwa 2-8°C kwa hadi 48h.Tafadhali tumia suluhisho lililotengenezwa tayari.
Mwongozo wa Uchambuzi wa Tatizo
Ufuatao ni uchanganuzi wa matatizo ambayo yanaweza kupatikana katika uchimbaji wa virusi vya DNA/RNA, ukitumaini kuwa msaada kwa majaribio yako.Zaidi ya hayo, kwa matatizo mengine ya majaribio au ya kiufundi zaidi ya maagizo ya uendeshaji na uchanganuzi wa matatizo, tumetoa usaidizi wa kiufundi ili kukusaidia.Ikiwa una mahitaji yoyote, tafadhali wasiliana nasi: 028-83360257 au E-mail:
Tech@foregene.com.
Hakuna uchimbaji wa asidi ya nucleic au mavuno ya chini ya asidi ya nukleiki
Kwa kawaida kuna mambo mengi yanayoathiri ufanisi wa urejeshaji, kama vile: sampuli ya maudhui ya asidi ya nukleiki, njia ya uendeshaji, kiasi cha elution, n.k.
Uchambuzi wa sababu za kawaida:
1. Umwagaji wa barafu au joto la chini (4 ° C) centrifugation ilifanyika wakati wa utaratibu.
Pendekezo: Fanya kazi kwenye joto la kawaida (15-25 ° C) katika mchakato mzima, usiweke kuoga kwa barafu na uingizaji wa joto la chini.
2. Sampuli ilihifadhiwa vibaya au sampuli ilihifadhiwa kwa muda mrefu sana.
Pendekezo: Hifadhi sampuli kwa -80°C na uepuke kugandisha mara kwa mara na kuyeyusha;jaribu kutumia sampuli mpya zilizokusanywa kwa uchimbaji wa asidi ya nukleiki.
3. Uchambuzi wa sampuli haitoshi.
Pendekezo: Tafadhali hakikisha kwamba sampuli na suluhisho la kufanya kazi la lysis zimechanganywa kabisa na kuangaziwa kwenye joto la kawaida (15-25°C) kwa dakika 10.
4. Nyongeza isiyo sahihi ya eluent.
Pendekezo: Hakikisha kuwa RNase-Free ddH2O imeongezwa kwa njia ya kushuka katikati ya safu wima ya utakaso, na usiiangusha kwenye pete ya safu wima ya utakaso.
5. Kiasi sahihi cha ethanoli kabisa hakikuongezwa kwenye Buffer RW2.
Pendekezo: Tafadhali fuata maagizo, ongeza kiwango sahihi cha ethanoli kabisa kwenye Buffer RW2 na uchanganye vizuri kabla ya kutumia kit.
6. Kiasi cha sampuli kisichofaa.
Pendekezo: 200µl ya sampuli huchakatwa kwa kila 500µl ya Buffer DRL.Uchakataji mwingi wa sampuli utasababisha kupungua kwa uzalishaji wa asidi nucleic.
7. Kiasi kisichofaa cha elution au upotoshaji usio kamili.
Pendekezo: Kiasi kisichojulikana cha safu ya utakaso ni 30-50μl;ikiwa athari ya elution hairidhishi, inashauriwa kuongeza muda kwenye joto la kawaida baada ya kuongeza ddH2O isiyo na joto ya RNase-Free, kama vile 5-10min.
8. Ethanoli inabaki kwenye safu baada ya kuosha na Buffer RW2.
Pendekezo: Iwapo ethanoli itasalia baada ya kuingizwa kwa Buffer RW2 kwa dakika 2, safu inaweza kuwekwa kwenye joto la kawaida kwa dakika 5 baada ya kuingizwa ili kuondoa kabisa ethanoli iliyobaki.
Asidi ya nucleic iliyosafishwa imeharibiwa
Ubora wa asidi ya nucleic iliyosafishwa inahusiana na uhifadhi wa sampuli, uchafuzi wa RNase, uendeshaji na mambo mengine.Uchambuzi wa sababu za kawaida:
1. Sampuli zilizokusanywa hazikuhifadhiwa kwa wakati.
Pendekezo: Ikiwa sampuli haitatumiwa kwa wakati baada ya kukusanywa, tafadhali ihifadhi kwa -80°C kwenye halijoto ya chini mara moja.Kwa uchimbaji wa RNA, jaribu kutumia sampuli mpya zilizokusanywa.
2. Kusanya sampuli na kufungia na kuyeyuka mara kwa mara.
Pendekezo: Epuka kufungia na kuyeyusha (si zaidi ya mara moja) wakati wa kukusanya na kuhifadhi sampuli, vinginevyo mavuno ya asidi ya nucleic yatapungua.
3. RNase huletwa kwenye chumba cha operesheni au glavu zinazoweza kutumika, masks, nk hazivaliwa.
Pendekezo: Majaribio ya uchimbaji wa RNA hufanywa vyema zaidi katika chumba tofauti cha upasuaji cha RNA, na meza ya maabara inapaswa kusafishwa kabla ya jaribio.
Vaa glavu na vinyago vinavyoweza kutupwa wakati wa jaribio ili kuepuka uharibifu wa RNA unaosababishwa na kuanzishwa kwa RNase kwa kiwango kikubwa zaidi.
4. Kitendanishi kilichafuliwa na RNase wakati wa matumizi.
Pendekezo: Badilisha na Kifurushi kipya cha Kutenga cha Viral DNA/RNA kwa majaribio yanayohusiana.
5. Mirija ya centrifuge na vidokezo vya pipette vinavyotumiwa kwa uendeshaji wa RNA vimechafuliwa na RNase.
Pendekezo: Hakikisha kwamba mirija ya katikati, vidokezo vya bomba, bomba, n.k. zinazotumiwa kwa uchimbaji wa RNA zote hazina RNase.
Asidi ya nucleic iliyosafishwa huathiri majaribio ya chini ya mkondo
DNA na RNA zilizosafishwa kwa safu ya utakaso, ikiwa ioni ya chumvi na maudhui ya protini ni ya juu sana, itaathiri majaribio ya chini, kama vile: ukuzaji wa PCR, unukuzi wa kinyume, n.k.
1. DNA zilizotolewa na RNA zina ioni za chumvi zilizobaki.
Pendekezo: Hakikisha kwamba kiasi sahihi cha ethanoli kabisa kinaongezwa kwenye Buffer RW2, na uoshe safu wima ya utakaso mara mbili kwa kasi ya kupenyeza iliyobainishwa katika maagizo ya uendeshaji;Fanya uwekaji katikati ili kupunguza uchafuzi wa ioni za chumvi.
2. DNA na RNA zilizotolewa zina mabaki ya ethanoli.
Pendekezo: Baada ya kuthibitisha kuosha na Buffer RW2, fanya centrifugation ya tube tupu kwa kasi ya centrifugation katika maelekezo ya uendeshaji;ikiwa bado kuna mabaki ya ethanol, unaweza centrifuge tube tupu na kisha kuiweka kwenye joto la kawaida kwa dakika 5 ili kuondoa mabaki ya ethanol kwa kiwango kikubwa zaidi.
Miongozo ya Maagizo:
Mwongozo wa Maagizo ya Vifaa vya Kutengwa vya DNA & RNA ya Virusi
