QuickEasyᵀᴹ PCR Kit-Taqman ya Wakati Halisi
Maelezo
2 × QuickEasyTMHalisi PCR Mix-Taqman iliyotolewa na QuickEasyTMSeti ya Kitengo cha Wakati Halisi cha PCR Kit-Taqman ni mfumo mkuu wa kizazi kipya ulioundwa kwa ajili ya mwitikio wa ukuzaji wa PCR wa Wakati Halisi kwa kutumia vichunguzi mahususi vya fluorescent.Msingi wake wa Foregene HS Taq DNA Polymerase inategemea urekebishaji wa Kingamwili, unaotumiwa pamoja na mfumo wa PCR ulioboreshwa zaidi wa Foregene, una umaalum wa hali ya juu na ufanisi wa ukuzaji.Ikilinganishwa na mchanganyiko wa kawaida wa PCR, ina uwezo mkubwa wa ukuzaji na kiwango cha chini cha kutolingana.Inaweza kutumika katika mmenyuko wa upimaji wa PCR wa fluorescence ili kupunguza ukuzaji usio maalum na kuboresha usahihi wa PCR.Inaweza kuboresha kwa kiasi kikubwa umaalum wa bidhaa na unyeti wa majibu.Wakati huo huo, ROX ilitolewa kama rangi ya kumbukumbu ya ndani.
QuickEasyTMSeti ya Muda Halisi ya PCR Kit-Taqman ina wigo mpana wa matumizi kwa kiasi cha kiolezo, na inaweza kupata curve nzuri ya kawaida katika maeneo tofauti ya kiasi, na inaweza kuhesabu kwa usahihi na kutambua jeni lengwa kwa kurudiwa vizuri na ujasiri wa juu.
Vipimo
Maandalizi 200,Maandalizi 500,Maandalizi 1000,2000 Maandalizi
Vipengele vya kit
QuickEasyTMWakati Halisi PCR Kit-Taqman(20μlmfumo) | ||||
Yaliyomo kwenye vifaa | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
Maandalizi 200 | Maandalizi 500 | Maandalizi 1000 | 2000 Maandalizi | |
2×HarakaRahisiTM PCR halisi Changanya-Taqman | 1 ml×2 | 1.7 ml×3 | 1.7 ml×6 | 1.7 ml×12 |
20×Rangi ya Marejeleo ya ROX | 200μL | 0.5 ml | 1 ml | 1 ml×2 |
DNase-Free ddH2O | 1.7 ml | 1.7 ml×2 | 10 ml | 20 ml |
IFU | 1kipande | 1kipande | 1kipande | 1kipande |
Vipengele&faida
■ Mfumo wa kipekee wa uboreshaji wa PCR hufanya 2×QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman inaendana zaidi.
■ Hot-start Foregene HS Taq Polymerase ina ufanisi wa juu wa ukuzaji, usikivu wa juu wa ukuzaji, na umaalum wa juu zaidi wa ukuzaji.
■ 2× QuickEasyTM Real PCR Mix -Taqman hutumia mfumo wa kipekee ulioboreshwa na Foregene ili kuboresha unyeti na umaalumu wa ugunduzi wa uchunguzi wa mfuatano mahususi, ambao unaweza kutumika kwa uandishi wa jeni na ubainishaji wa utofauti wa nambari na kupata matokeo sahihi.
■ Bidhaa hii inakuja na rangi ya marejeleo ya ndani ya ROX, ambayo inaweza kutumika kuondoa usuli wa mawimbi na hitilafu ya ishara kati ya visima, ambayo ni rahisi kwa wateja kutumia katika aina tofauti za zana za kiasi cha PCR.
Programu ya kit
■ PCR ya kiasi cha Fluorescence kwa uchanganuzi wa kiasi cha kiolezo;
■ Cukuzaji wa kawaida wa PCR;
■ Inaweza kutumika kutambua aleli.
Uhifadhi na maisha ya rafu
Kit kinapaswa kuhifadhiwa kwenye -20 ° C katika giza;ikiwa inatumiwa mara kwa mara, inaweza pia kuhifadhiwa kwa 4 ° C kwa muda mfupi (tumia ndani ya siku 10).
Kanuni za muundo wa primer ya Muda Halisi ya PCR
Sambaza Kitangulizi na Kitangulizi cha Nyuma
Kwa PCR ya Wakati Halisi, muundo wa primer ni muhimu sana.Viunzilishi vinahusiana na umaalum na ufanisi wa ukuzaji wa PCR, na vinaweza kuundwa kwa kuzingatia kanuni zifuatazo:
Urefu wa primer: 18-30bp.
Maudhui ya GC: 40-60%.
Thamani ya Tm: Programu ya usanifu wa primer, kama vile Primer 5, inaweza kutoa thamani ya Tm ya kitangulizi.Thamani za Tm za vianzilishi vya juu na chini zinapaswa kuwa karibu iwezekanavyo.Fomula ya hesabu ya Tm pia inaweza kutumika: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Wakati wa kutekeleza PCR, halijoto iliyo chini ya thamani ya primer Tm ya 5 °C kwa ujumla huchaguliwa kama halijoto ya kuchuja (ongezeko linalolingana la halijoto ya kuchubua kunaweza kuongeza umaalum wa mmenyuko wa PCR).
Primers na bidhaa za PCR:
Urefu wa bidhaa ya ukuzaji wa kitangulizi cha PCR ni ikiwezekana 100-150bp.
Vipimo vya uundaji katika eneo la sekondari la muundo wa kiolezo vinapaswa kuepukwa iwezekanavyo.
Epuka uundaji wa besi 2 au zaidi zinazosaidiana kati ya ncha 3′ za vianzio vya juu na vya chini vya mkondo.
Msingi wa msingi wa 3′ hauwezi kuwepo na G au C 3 za ziada mfululizo.
The primers wenyewe hawezi kuwa na miundo ya ziada, vinginevyo muundo wa hairpin utaundwa, unaoathiri amplification ya PCR.
ATCG inapaswa kusambazwa kwa usawa iwezekanavyo katika mfuatano wa kwanza, na msingi wa 3′ unapaswa kuepukwa kama T.
Kiambatisho cha 1: Kifurushi cha kijenzi cha kijenzi cha Cell Direct RT-qPCR
1.Suluhisho la Lysis ya seli
| |||
Vipengele vya kit (mfumo wa 24 wa kisima / kisima) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
SehemuI | Bafa CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Bafa ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
SehemuII | Kifutio cha DNA | 400 μl | 1 ml × 2 |
2. RT Mchanganyiko
| |
Vipengele vya kit (Mfumo wa majibu ya 20 μl) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Mchanganyiko wa RT wa moja kwa moja | 800 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7 ml × 2 |
| ||
Vipengele vya kit (Mfumo wa majibu ya 20 μl) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Moja kwa Moja qPCR Mix-SYBR | 1 ml × 2 | 1.7 ml × 6 |
50× ROX Reference Dye | 40 μl | 200 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7 ml | 10 ml |