W:Ndugu, unukuzi wa kinyume umekamilika, na hatimaye hatua ya mwisho - PCR ya kiasi cha fluorescent!Halo, kaka, PCR ya upimaji wa wakati halisi ni nini?
M:PCR unajua kila wakati, sivyo?
W:Unajua, PCR ni mmenyuko wa mnyororo wa polimerasi, na ni teknolojia inayoongeza DNA!
M:Inakaribia… Ni mbinu ya kiufundi ya kukuza mfuatano lengwa hadi zaidi ya mara milioni moja kupitia vianzio maalum, lakini hii inaonyesha tu kuwepo au kutokuwepo kwa mfuatano lengwa, na haiwezi kubainisha kiasi cha kiolezo cha awali.Fluorescence quantitative PCR ni njia ya kiufundi iliyoundwa kutatua tatizo hili.PCR ya wakati halisi na kiasi cha PCR (qPCR) kwa ujumla hurejelea.
W: Tofauti kutoka kwa PCR ya kawaida iko katika upimaji wa fluorescence?
M:Ndiyo, yaani, katika hatua ya ugani ya kila mzunguko wa PCR, nguvu ya ishara ya fluorescence hugunduliwa, na kiasi cha awali cha template kinaweza kuhesabiwa kulingana na mabadiliko ya ukubwa wa ishara.
W:Inahisi kuwa ngumu sana!Je, ni lazima nihesabu hii peke yangu?
M:Hii inakuhitaji ujifunze polepole, ni bora kuweza kuelewa kanuni.Sasa unaweza kuzingatia thamani ya CT kwanza, ambayo ni data ya majaribio ya angavu, na ukubwa wake unalingana na ukubwa wa kiasi cha template ya awali.Pia kuna grafu kama vile mikondo ya ukuzaji na mikunjo ya kuyeyuka.Wana usemi wa mwisho ikiwa jaribio lako limefaulu au la.
W: Ah, ndugu.Kisha nitafanya jaribio la qPCR!
M:Zingatia sana usiongeze violezo kwenye eneo la kitendanishi, vinginevyo mchanganyiko wako ambao haujatumiwa utachafuliwa kwa urahisi!
W: Nimeelewa!

Wakati Halisi PCR Easyᵀᴹ-SYBR Green I Kit

Ufanisi wa juu, maalum zaidi
Usikivu wa juu, utangamano mzuri