• facebook
  • zilizounganishwa
  • youtube
ukurasa_bango

Cell Direct RT qPCR Kit—Taqman Direct Cell Lysis Cell Tayari Hatua Moja qRT-PCR Kits Probe

Maelezo ya Kiti:

Cat.No.DRT-01021/01022

Kwa seli moja kwa moja RT-qPCR kwa kutumia ≤ seli 1000,000,

na kutekeleza RT qPCR moja kwa moja kutoka kwa seli bila utakaso wa awali wa RNA.

Seli huwekwa lysed moja kwa moja ili kutoa RNA kwa RT-qPCR;mfumo wa juu wa ustahimilivu huifanya kuwa isiyohitajika kusafisha RNA na kutumia moja kwa moja lisaiti za seli kama violezo vya RNA kwa miitikio ya RT.Haraka na rahisi;unyeti wa juu, umaalumu dhabiti, na uthabiti mzuri.

◮Rahisi na bora: kwa teknolojia ya Cell Direct RT, sampuli za RNA zinaweza kupatikana kwa dakika 7 tu.

Sampuli ya mahitaji ni ndogo, hadi seli 10 zinaweza kujaribiwa.

◮Utumiaji wa juu: inaweza kutambua kwa haraka RNA katika seli zilizokuzwa katika sahani 384, 96, 24, 12, 6-visima.

Kifutio cha DNA kinaweza kuondoa haraka jenomu zilizotolewa, kupunguza sana athari kwenye matokeo ya majaribio yanayofuata.

Mfumo wa RT na qPCR ulioboreshwa hufanya unukuzi wa hatua mbili wa RT-PCR kuwa bora zaidi na PCR mahususi zaidi, na kustahimili vizuizi vya majibu ya RT-qPCR.


  • :
  • Maelezo ya Bidhaa

    Lebo za Bidhaa

    Maswali Yanayoulizwa Mara kwa Mara

    Pakua Rasilimali

    Maelezo

    Bidhaa hii hutumia mfumo wa kipekee wa akiba ya lysis ili kutoa kwa haraka RNA kutoka kwa sampuli za seli zilizotengenezwa kwa miitikio ya RT-qPCR, kuondoa mchakato unaotumia muda na unaosumbua wa utakaso wa RNA, na dakika 7 pekee ili kupata kiolezo kinachohitajika cha RNA, kwa kutumia Mchanganyiko wa 5× Direct RT, 2× Direct qPCR Mix-Taqman inayotolewa na kifurushi cha muda halisi cha matokeo.

    5× Direct RT Mix na 2× Direct qPCR Mix-Taqman zina ustahimilivu mkubwa wa vizuizi na zinaweza kufanya urejeshaji bora na ukuzaji mahususi kwa kutumia lilisati ya sampuli itakayopimwa kama kiolezo.Kitendanishi kina Foregene Reverse Transcriptase, Moto D-Taq DNA Polymerase, dNTPs, MgCl2, Reaction Buffer, PCR Optimizer na Stabilizer, ambayo inaweza kutumika pamoja na lysis buffer kutambua kwa haraka na kwa urahisi sampuli, na ina sifa za unyeti wa juu, umaalumu na uthabiti.

    Vipimo

    200×20μl Rxns, 1000×20μl Rxns

    Vipengele vya kit

    QuickEasyTMKifaa cha Moja kwa Moja cha RT-qPCR Kit-Taqman

    Vipengele vya kit

    Mfumo wa Utendaji wa qPCR 20μl

    DRT-01021 DRT-01022  

    Kumbuka

    200 T 1000 T
     

     

    Sehemu I

    Bafa CL 4 ml 20 ml  

     Lysis ya seli

    Foregene Protease Plus II 80 μl 400 μl
    Bafa ST 400 μl 1 ml × 2
     

     

     

    Sehemu II

    Kifutio cha DNA 80 μl 400 μl
    5×Mchanganyiko wa RT wa moja kwa moja * 160 μl 800 μl RT
    2× Moja kwa moja qPCR Mix-Taqman * 1 ml × 2 1.7 ml × 6  

    qPCR

    20×ROX Reference Dye 40 μl 200 μl
    RNase-Free ddH2O 1.7 ml 10 ml  

    Mwongozo wa Maagizo

    kipande 1

    kipande 1

     

    *:Cell Lysis, 5×Direct RT Mix, 2× Direct qPCR Mix-Taqman inaweza kununuliwa kando.

    Vipengele&faida

    Rahisi na bora : kwa kutumia teknolojia ya Cell Direct RT, sampuli za RNA zinaweza kupatikana kwa dakika 7 pekee.

    ■ Sampuli ya mahitaji ni ndogo, hadi seli 10 zinaweza kujaribiwa.

    ■ Utoaji wa juu: inaweza kutambua kwa haraka RNA katika seli zilizokuzwa katika sahani 384, 96, 24, 12, 6 za visima.

    ■ Kifutio cha DNA kinaweza kuondoa haraka jenomu zilizotolewa, kupunguza kwa kiasi kikubwa athari kwenye matokeo ya majaribio yanayofuata.

    ■ Mfumo wa RT na qPCR ulioboreshwa hufanya unukuzi wa RT-PCR wa hatua mbili kuwa bora zaidi na PCR mahususi zaidi, na sugu zaidi kwa vizuizi vya majibu ya RT-qPCR.

    Programu ya kit

    Upeo wa maombi: seli za utamaduni.

    - RNA iliyotolewa kwa sampuli ya uchanganuzi: inatumika tu kwa kiolezo cha RT-qPCR cha kifaa hiki.

    - Seti hii inaweza kutumika kwa madhumuni yafuatayo: uchanganuzi wa usemi wa jeni, uthibitishaji wa athari ya kunyamazisha jeni ya siRNA, uchunguzi wa dawa, n.k.

    Uhifadhi na maisha ya rafu

    Sehemu ya I ya kit hii inapaswa kuhifadhiwa saa 4;Sehemu ya II inapaswa kuhifadhiwa kwa -20 ℃.

     Foregene Protease Plus II inapaswa kuhifadhiwa saa 4℃, usigandishe ifikapo -20℃.

     Wakala 2×Direct qPCR Mix-Taqman inapaswa kuhifadhiwa saa -20katika giza;ikiwa inatumiwa mara kwa mara, inaweza pia kuhifadhiwa saa 4℃ kwa hifadhi ya muda mfupi (tumia ndani ya siku 10).


  • Iliyotangulia:
  • Inayofuata:

  • Kanuni za muundo wa primer ya Muda Halisi ya PCR

    Sambaza Kitangulizi na Kitangulizi cha Nyuma

    Kwa PCR ya Wakati Halisi, muundo wa primer ni muhimu sana.Viunzilishi vinahusiana na umaalum na ufanisi wa ukuzaji wa PCR, na vinaweza kuundwa kwa kuzingatia kanuni zifuatazo:

    • Urefu wa primer: 18-30bp.
    • Maudhui ya GC: 40-60%.
    • Thamani ya Tm: Programu ya usanifu wa primer, kama vile Primer 5, inaweza kutoa thamani ya Tm ya kitangulizi.Thamani za Tm za vianzilishi vya juu na chini zinapaswa kuwa karibu iwezekanavyo.Fomula ya hesabu ya Tm pia inaweza kutumika: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Wakati wa kutekeleza PCR, halijoto iliyo chini ya thamani ya primer Tm ya 5 °C kwa ujumla huchaguliwa kama halijoto ya kuchuja (ongezeko linalolingana la halijoto ya kuchubua kunaweza kuongeza umaalum wa mmenyuko wa PCR).
    • Primers na bidhaa za PCR:
    1. Urefu wa bidhaa ya ukuzaji wa kitangulizi cha PCR ni ikiwezekana 100-150bp.
    2. Vipimo vya uundaji katika eneo la sekondari la muundo wa kiolezo vinapaswa kuepukwa iwezekanavyo.
    3. Epuka uundaji wa besi 2 au zaidi zinazosaidiana kati ya ncha 3′ za vianzio vya juu na vya chini vya mkondo.
    4. Msingi wa msingi wa 3′ hauwezi kuwepo na G au C 3 za ziada mfululizo.
    5. The primers wenyewe hawezi kuwa na miundo ya ziada, vinginevyo muundo wa hairpin utaundwa, unaoathiri amplification ya PCR.
    6. ATCG inapaswa kusambazwa kwa usawa iwezekanavyo katika mfuatano wa kwanza, na msingi wa 3′ unapaswa kuepukwa kama T.

    Nyongeza1:Cmoja kwa mojaRT-qPCR Sehemu ya vifaat nyongeza pakiti

    1.Kiini Lysis Solution

    Suluhisho la Lysis ya seli

    Vipengele vya kit

    (mfumo wa 24 wa kisima / kisima)

    DRT-01011-A1

    DRT-01011-A2

    100 T

    500 T

    SehemuI

    Bafa CL

    20 ml

    100 ml

    Foregene Protease Plus II

    400 μl

    1 ml × 2

    Bafa ST

    1 ml × 2

    10 ml

    SehemuII

    Kifutio cha DNA

    400 μl

    1 ml × 2

    2. Mchanganyiko wa RT

    Mchanganyiko wa RT

    Vipengele vya kit

    (Mfumo wa majibu ya 20 μl)

    DRT-01011-B1

    200 T

    5× Mchanganyiko wa RT wa moja kwa moja

    800 μl

    RNase-Free ddH2O

    1.7 ml × 2

    3Mchanganyiko wa qPCR

    Mchanganyiko wa qPCR

    Vipengele vya kit

    (Mfumo wa majibu ya 20 μl)

    DRT-01021-C1

    DRT-01021-C2

    200 T

    1000 T

    2× Moja kwa moja qPCR Mix-Taqman

    1 ml × 2

    1.7 ml × 6

    20× ROX Reference Dye

    40 μl

    200 μl

    RNase-Free ddH2O

    1.7 ml

    10 ml

     

    Miongozo ya Maagizo:

     Quick Easy Cell Direct RT-qPCR Kit-Taqman

    Andika ujumbe wako hapa na ututumie